[發明專利]一種獲得微生物抗菌素的方法

在審

• 申請號: 201910551937.0
• 申請日: 2019-06-25
• 公開（公告）號: CN110305911A
• 公開（公告）日: 2019-10-08
• 發明（設計）人: 陳華成
• 申請（專利權）人: 太倉新亞遜生物科技有限公司
• 主分類號: C12P1/00
• 分類號: C12P1/00;C12Q1/18
• 代理公司: 蘇州周智專利代理事務所(特殊普通合伙) 32312
• 代理人: 周雅卿

本發明公開了一種獲得微生物抗菌素的方法，包括以下步驟：A1、在固體培養基上覆蓋微芯片；所述微芯片為聚二甲基硅氧烷材質的膜，其厚度為3mm?5mm，其上具有陣列分布的貫穿孔，各貫穿孔之間無連接；A2、完成A1)后，在不同貫穿孔中加入體積相等但含有不同濃度待測抗菌素的液相，晾干；A3、完成A2)后，在所述貫穿孔中加入含有目的微生物的液相，培養并觀察微生物生長情況，從而獲知待測抗菌素實現抑制或殺滅目的微生物的濃度。通過上述方式，本發明獲得的抗菌素能夠實現抑制或殺滅目的微生物，具有十分廣闊的應用前景。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別是涉及一種獲得微生物抗菌素的方法。

背景技術

現最常用的抗菌藥物篩選方法有紙片擴散法和稀釋法。紙片擴散法是將含有定量抗菌藥物的紙片貼在接種了被測菌的瓊脂表面上，隨著藥物在瓊脂中的擴散，在紙片周圍形成藥物的濃度梯度，從而形成不同大小的抑菌圈，反應測試菌對藥物的敏感程度。紙片擴散法由于不同的菌對藥物的敏感性不同，產生的抑菌環大小也有所不同，如果菌種不純，實驗中的抑菌環和純培養狀態下產生的抑菌環相比存在較大的差異，影響判斷結果的準確性。稀釋法又分為肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法。肉湯稀釋法是用肉湯將抗菌藥物按照不同濃度稀釋到無菌試管或者微量稀釋孔內，再接種待測菌，定量測定抗菌藥物的最低抑菌或殺菌濃度(MBC)。瓊脂稀釋法是將不同的抗菌藥物分別混勻于瓊脂培養基中，配置出含有各種濃度藥物的平板，在平板中接種細菌后，孵育觀察細菌在不同濃度藥物平板的生長情況，觀察以抑制細菌生長的平板所含藥物濃度測得最低抑菌濃度(MIC)。稀釋法雖然可以將被測菌放置在純培養狀態下生長，結果可靠，但是不管是肉湯稀釋法還是瓊脂稀釋法，操作起來費時費力，不適用于大規模、快速高效藥物篩選。

發明內容

本發明主要解決的技術問題是提供一種獲得微生物抗菌素的方法，獲得的抗菌素能夠實現抑制或殺滅目的微生物，具有十分廣闊的應用前景。

為解決上述技術問題，本發明采用的一個技術方案是：提供一種獲得微生物抗菌素的方法，包括以下步驟：

A1、在固體培養基上覆蓋微芯片；所述微芯片為聚二甲基硅氧烷材質的膜，其厚度為3mm-5mm，其上具有陣列分布的貫穿孔，各貫穿孔之間無連接；

A2、完成A1)后，在不同貫穿孔中加入體積相等但含有不同濃度待測抗菌素的液相，晾干；

A3、完成A2)后，在所述貫穿孔中加入含有目的微生物的液相，培養并觀察微生物生長情況，從而獲知待測抗菌素實現抑制或殺滅目的微生物的濃度。

本發明為了解決其技術問題所采用的進一步技術方案是：

進一步地說，還包括如下步驟：

B1、在固體培養基上覆蓋微芯片；所述微芯片為聚二甲基硅氧烷材質的膜，其厚度為3mm-5mm，其上具有陣列分布的貫穿孔，各貫穿孔之間無連接；

B2、完成B1)后，在不同貫穿孔中加入體積相等但含有不同濃度的目的微生物的液相，培養并觀察微生物生長情況，以確定A3)中“含有目的微生物的液相”中的目的微生物的濃度。

進一步地說，所述微芯片的制備方法包括以下步驟：

C1、將光刻膠涂在基片上并烘干，同掩膜一起經過光刻、顯影過程獲得所述微芯片的模具；

C2、在所述微芯片的模具上澆注聚二甲基硅氧烷，固化后剝離所述微芯片的模具得到所述微芯片。

進一步地說，所述貫穿孔的孔徑為2-3cm。

進一步地說，所述微生物的液相的質量濃度為50-60％。

進一步地說，所述光刻膠的涂布厚度為2-3mm。

本發明的有益效果是：