[發明專利]一種改進的高活性耐熱的肌酸水解酶及其應用

有效

• 申請號: 201910551197.0
• 申請日: 2019-06-24
• 公開（公告）號: CN110257359B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 雷潔;戴俊
• 申請（專利權）人: 湖南艾科瑞生物工程有限公司
• 主分類號: C12N9/78
• 分類號: C12N9/78;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 深圳市恒程創新知識產權代理有限公司 44542
• 代理人: 趙愛蓉

1.一個改進的肌酸水解酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

2.一種分離的多核苷酸，所述分離的多核苷酸選自：

(1) SEQ ID NO：3所示的多核苷酸；和

(2)與（1)所述的多核苷酸互補的多核苷酸。

3.一種載體，其包含SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。

4.如權利要求3所述的載體，其特征在于載體為PUC系列，pET系列，或pGEX中的任—種。

5.一種宿主細胞，其含有權利要求3或4所述的載體。

6.如權利要求5所述的宿主細胞，包括:細菌和酵母。

7.一種發酵生產重組肌酸水解酶的方法：從甘油管中按0.4％的接種量將權利要求5或6所述的宿主細胞接入20mL/250mL三角瓶，回旋式搖床轉速200rpm，培養溫度為37℃，培養12h，發酵培養：將培養好的種子培養液按1％(v/v)的接種量接種至50mL/500mL三角瓶中進行培養，培養溫度為37℃，搖床轉速200rpm；待OD600＝0.6，加入終濃度為0.6mmol/L 的IPTG誘導表達，培養10h。