[發明專利]植物生產口服索瑪魯泰（Semaglutide）與蚓激酶的融合蛋白降糖膠囊的應用

有效

• 申請號: 201910550611.6
• 申請日: 2019-06-24
• 公開（公告）號: CN110256581B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 王躍駒
• 申請（專利權）人: 王躍駒
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/82;A01H5/10;A01H5/12;A01H5/06;A01H6/14;A01H6/82;A01H6/20;A01H6/46;A01H6/54;A61K38/26;A61K9/48;A61K47/64
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 劉穎

本發明涉及生物醫藥技術領域，特別涉及植物生產口服索瑪魯泰(Semaglutide)與蚓激酶降糖膠囊的應用。本發明利用植物例如生菜作為重組蛋白質生產的有效表達平臺，利用簡單以及高效的表達體系生產生物活性物質。隨后將生產該活性物質的葉片凍干制成膠囊。此膠囊可以在常溫保存而保持生物活性。利用Western Blot蛋白雜交法確定降糖活性蛋白成功表達。生物活性測試結果表明利用該平臺技術生產的降糖膠囊顯著降低了狗血液中的血糖濃度。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，特別涉及植物生產口服索瑪魯泰(Semaglutide)與蚓激酶的融合蛋白降糖膠囊的應用。

背景技術

糖尿病是以慢性高血糖為特征的常見病、多發病，是由體內胰島素分泌或作用缺陷，或二者同時存在而引起的糖、脂肪、蛋白質代謝紊亂。臨床上主要有胰島素依賴型(IDDM，I型)和非胰島素依賴型(NIDDM，II型)兩種類型。隨著生活水平提高，無論在發達國家還是在發展中國家，糖尿病的發病率都在逐年上升。糖尿病作為一種嚴重的非傳染性慢性疾病現已成為全世界各國密切關注的重大公共衛生問題之一，是全球范圍內繼心血管和腫瘤疾病之后的第三號殺手。從世界衛生組織公布的數據來看，1995年全球糖尿病患者僅3000萬人左右，而到了1997年已增至1.35億，到2030年將有3億II型糖尿病患者，患者增幅最快的地區為亞洲和非洲。II型糖尿病患者的傳統治療模式一般是遵循飲食控制、口服抗糖尿病藥物和外源性胰島素的階梯式治療。但目前糖尿病治療領域仍存在著諸多尚待解決的重要問題，而且還存在一些副作用和限制。

胰高血糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是由腸道內分泌細胞分泌的腸降血糖素，是胰高血糖素原基因翻譯后加工產物，在體內有多種存在形式。它具有以下生理作用：以葡萄糖依賴方式作用于胰島β細胞，促進胰島素基因的轉錄，增加胰島素的生物合成和分泌；刺激β細胞的增殖和分化，抑制β細胞凋亡，從而增加胰島β細胞數量，抑制胰高血糖素的分泌，抑制食欲及攝食，延緩胃內容物排空等。這些功能都有利于降低餐后血糖并使血糖維持在恒定水平。

盡管天然GLP-1在治療糖尿病上有諸多優點，但它的體內半衰期僅為2分鐘左右，限制了其在臨床上的直接應用。而將天然的GLP-1中的某些氨基酸突變后可以在保證其活性的條件下延長它的半衰期，做到每周一次給藥就可以保持正常的血糖水平。目前已經上市的相關產品有Liraglutide、Dulaglutide、Semaglutide等。由于多肽類藥物本身的性質以及人體對其產生的各種屏障，其常規給藥途經一直以注射為主。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了植物生產口服杜拉魯肽與納豆激酶降糖膠囊的應用。本發明利用植物尤其是生菜作為重組蛋白生產的高效平臺技術，表達了索瑪魯泰Semaglutide與蚓激酶的融合蛋白。并且制成口服降糖膠囊。因此，提供一種治療糖尿病的口服制劑具有重要的現實意義。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了索瑪魯泰(Semaglutide)與蚓激酶的融合蛋白，其具有：

(Ⅰ)、如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；或

(Ⅱ)、如(Ⅰ)所述的氨基酸序列經取代、缺失或添加一個或多個氨基酸獲得的氨基酸序列，且與(Ⅰ)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列；或

(III)、與(Ⅰ)或(Ⅱ)所述序列至少有80％同源性的氨基酸序列。

在本發明的一些具體實施方案中，所述多個為2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個或16個、17個、18個、19個、20個、21個、22個、23個、24個、25個、26個、27個、28個、29個、30個、31個或32個。

本發明還提供了編碼所述融合蛋白的核苷酸，具有