[發(fā)明專利]檢測塞內(nèi)卡病毒抗體的試劑及其所用多肽

有效

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• 申請日: 2019-06-24
• 公開（公告）號: CN110229218B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發(fā)明（設計）人: 孫雨;王睿男;王傳彬;趙曉春;楊林;肖穎;宋曉暉;蔣菲;白崇生;王美君;央珍;李碩;劉林青;鄒聯(lián)斌;曾邦權;肖開提·阿不都克里木;王文;扎西卓瑪;林漢亮;李曉霞;亢文華;劉健鵬;徐琦;蘇曉慧;劉玉良;畢一鳴;馬英;李舵;任娟;馬曉燕;薛文;秦菊;楊天意;孫航
• 申請（專利權）人: 中國動物疫病預防控制中心（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部屠宰技術中心）
• 主分類號: C07K14/085
• 分類號: C07K14/085;C07K19/00;G01N33/569;G01N33/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 11245
• 代理人: 任鳳華

本發(fā)明公開了檢測塞內(nèi)卡病毒抗體的試劑及其所用多肽。該試劑由eVP1?1偶聯(lián)物和eVP2?1偶聯(lián)物組成；eVP1?1偶聯(lián)物是由eVP1?1和載體蛋白偶聯(lián)得到的完全抗原；eVP2?1偶聯(lián)物是由eVP2?1和載體蛋白偶聯(lián)得到的完全抗原；eVP1?1是氨基酸序列為SEQ ID No.1的多肽，eVP2?1是氨基酸序列為SEQ ID No.2的多肽。以上述試劑作為包被原制備的抗體檢測試劑盒敏感性高，準確性高，操作簡單、快速，適用于基層各級獸醫(yī)部門和出入境檢驗檢疫局對塞內(nèi)卡病毒感染血清抗體的快速大量篩選檢測。

技術領域

本發(fā)明涉及檢測塞內(nèi)卡病毒抗體的試劑及其所用多肽。

背景技術

塞內(nèi)卡病毒病是由小核糖核酸病毒科塞內(nèi)卡病毒屬的A型塞內(nèi)卡病毒引起的，主要感染豬的病毒性傳染病，對不同年齡階段的豬都易感。成年豬感染初期出現(xiàn)厭食、嗜睡和發(fā)熱等癥狀，隨后鼻鏡部、口腔上皮、舌和蹄冠等部位的皮膚、黏膜產(chǎn)生水皰，繼而發(fā)生繼發(fā)性潰瘍和破潰現(xiàn)象，嚴重時蹄冠部的潰瘍可以蔓延至蹄底部，造成蹄殼松動甚至脫落，病豬出現(xiàn)跛行、站立困難以及多數(shù)傳染病常見的體溫升高、厭食和精神萎靡等癥狀。新生仔豬(7日齡以內(nèi))死亡率顯著增加(高達30％～70％)，偶爾伴有腹瀉癥狀。該病主要通過接觸傳播，可以引起豬的鼻吻、蹄部冠狀帶水泡病變，根據(jù)臨床癥狀與口蹄疫、豬水皰病和水泡性口炎等疾病在臨床上難以區(qū)分。

塞內(nèi)卡病毒的結構蛋白由VP0、VP2、VP3和VP1，4種蛋白組成，尤其是VP1與VP2蛋白其抗原性較強、相對保守，可刺激動物機體產(chǎn)生特異性免疫反應，成為塞內(nèi)卡病毒病的診斷靶抗原。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的一個技術問題是如何提高塞內(nèi)卡病毒抗體檢測的特異性，從而更準確地診斷塞內(nèi)卡病毒病。

為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了用于制備塞內(nèi)卡病毒抗體檢測試劑的成套多肽或用于制備塞內(nèi)卡病毒病診斷試劑的成套多肽。

本發(fā)明所提供的用于制備塞內(nèi)卡病毒抗體檢測試劑的成套多肽或用于制備塞內(nèi)卡病毒病診斷試劑的成套多肽均由eVP1-1和eVP2-1組成；所述eVP1-1是P11、P12或P13的多肽：

P11、氨基酸序列為SEQ ID No.1的多肽，

P12、氨基酸序列為SEQ ID No.1的第2-16位的多肽，

P13、在P12的多肽的氨基末端或羧基末端連接氨基酸殘基以與載體蛋白偶聯(lián)得到的多肽；

所述eVP1-2是P21、P22或P23的多肽：

P21、氨基酸序列為SEQ ID No.2的多肽，

P22、氨基酸序列為SEQ ID No.2的第2-15位的多肽，

P23、在P22的多肽的氨基末端或羧基末端連接氨基酸殘基以與載體蛋白偶聯(lián)得到的多肽。

其中，SEQ ID No.1由16個氨基酸殘基組成，第1位的半胱氨酸殘基是為了與載體蛋白連接添加的連接臂，其它氨基酸殘基來源于塞內(nèi)卡病毒VP1蛋白；SEQ ID No.2由15個氨基酸殘基組成，第1位的半胱氨酸殘基是為了與載體蛋白連接添加的連接臂，其它氨基酸殘基來源于塞內(nèi)卡病毒VP2蛋白。

上述成套多肽中，所述eVP1-1和所述eVP2-1的質(zhì)量比本領域技術人員可根據(jù)對塞內(nèi)卡病毒抗體檢測效果確定，如可為4:6。

上述成套多肽在制備檢測塞內(nèi)卡病毒抗體的試劑中的應用也屬于本發(fā)明的保護范圍。

上述成套多肽在制備塞內(nèi)卡病毒病診斷抗原中的應用也屬于本發(fā)明的保護范圍。

為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了檢測塞內(nèi)卡病毒抗體的試劑或診斷塞內(nèi)卡病毒病的試劑。