[發明專利]一種鐵皮石斛組培快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201910542585.2
• 申請日: 2019-06-21
• 公開（公告）號: CN110100737A
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: 金峰
• 申請（專利權）人: 臺州市椒江草之堂生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種鐵皮石斛組培快速繁殖方法，其特征在于：依次包括以下步驟：1)、取材：選用生長健壯的鐵皮石斛上結90天以上的未開裂的成熟蒴果，將其采用無菌洗液洗凈、瀝干后備用；

2)、種子的誘導萌發與分化：將步驟1)所得的蒴果經消毒后，切除其首尾兩端各0 .3～0 .7cm后縱向剖開，取出種子，將種子均勻接種到種子萌發分化培養基上，在組培室內進行培養；

設置培養條件為：誘導初期10～15天，進行暗培養，溫度設置為24～26℃，濕度60～70％；后期43～47天，進行光照與暗培養交替培養，溫度設置為24～26℃，濕度60～70％，光照時間為8h/d，光照強度為1000-1200lux，16小時暗培養；培養結束獲得原球莖；

3)、幼苗的增殖：將將步驟2)所獲得的原球莖，選取長勢旺盛、均勻的原球莖，進行一次擴繁，系數設置為95～105倍，均勻轉接于幼苗增殖培養基進行增殖培養；

設置培養條件為：增殖初期10～15天，進行暗培養，溫度設置為24～26℃，濕度60～70％；后期45～75天，進行光照與暗培養交替培養，溫度設置為24～26℃，濕度60～70％，光照時間為10h/d，光照強度為2000-2500lux，14小時暗培養；培養結束獲得叢生苗；

4)、壯苗生根：將步驟3)增殖培養獲得的叢生苗，選取長勢旺盛、均勻、長至2～3cm，將叢生苗從基部進行分割進行第二次擴繁，系數設置為7-～10倍，均勻轉移到壯苗生根培養基上進行壯苗生根培養；

設置培養條件為：壯苗初期13～15天，進行暗培養，溫度設置為24～26℃，濕度60～70％；后期65～75天，進行光照與暗培養交替培養，溫度設置為24～26℃，光照時間為12h/d，光照強度為2800-3000lux，12小時暗培養；培養結束獲得壯苗生根；

5)、移栽：待壯苗生根培養獲得的小苗長至4～5cm高、且長出長度大于等于2cm的根至少3條 時，獲得可出瓶種植種苗將，再通過半個月至一個月的室外煉苗，讓組培苗在瓶里適應自然環境后，瓶種植種苗從組培瓶中取出，采用清水洗除根部攜帶培養基，即可獲得健壯、成活率高的種植種苗。

2.根據權利要求1所述的一種鐵皮石斛組培快速繁殖方法，其特征在于：所述步驟2)中的種子萌發分化培養基為：MS+NAA0.25～0.35mg/L+蔗糖25～35g/L+瓊脂5～10g/L+土豆15～20g/L，pH為6.3。

3.根據權利要求1所述的一種鐵皮石斛組培快速繁殖方法，其特征在于：所述步驟3)中的幼苗增殖培養基為：MS+NAA0.45～0.5mg/L+蔗糖25～35g/L+瓊脂5～10g/L，pH為6.4～6.5。

4.根據權利要求1所述的一種鐵皮石斛組培快速繁殖方法，其特征在于：所述步驟4)中的壯苗生根培養基為：MS+NAA0.35mg/L+蔗糖25～35g/L+瓊 脂5～10g/L+香蕉110～120g/L，pH為6.3～6.5。

5.根據權利要求2-4任一所述的一種鐵皮石斛組培快速繁殖方法，其特征在于：所述MS培養基中還添加鉀肥0.35～0.45g/L、硅肥0.15～0.25g/L。