[發(fā)明專利]一種抗貓細(xì)小病毒的貓源化基因工程抗體

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910535002.3
• 申請日: 2019-06-20
• 公開（公告）號: CN110283246A
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 石晶;李雪;殷玉和;李希辰;趙健;付玉;張馨月
• 申請（專利權(quán)）人: 長春西諾生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;A61K39/42;A61P31/20
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 22214
• 代理人: 劉微

本發(fā)明公開了一種抗貓細(xì)小病毒的貓源化基因工程抗體，屬于抗體工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的抗體包括鼠源可變區(qū)和貓源化恒定區(qū)，其重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其重鏈恒定區(qū)基因序列如SEQ ID NO.5所示，其輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，其輕鏈恒定區(qū)基因序列如SEQ ID NO.6所示。本發(fā)明將犬細(xì)小病毒的單克隆抗體的可變區(qū)序列與貓源化恒定區(qū)進(jìn)行組裝，得到抗貓細(xì)小病毒的貓源化基因工程抗體，表現(xiàn)出良好的中和FPV病毒的活性，且具有抑制貓細(xì)小病毒對紅細(xì)胞的凝集作用，可將其應(yīng)用于犬細(xì)小病毒單克隆抗體貓源化研究等領(lǐng)域，對推動貓源化單克隆抗體藥物的發(fā)展具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗體工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種抗貓細(xì)小病毒的貓源化基因工程抗體。

背景技術(shù)

貓細(xì)小病毒(Feline parvovirus，F(xiàn)PV)，屬于細(xì)小病毒科、細(xì)小病毒屬，貓及貓科動物的泛白細(xì)胞減少癥的病原誘因，對幼貓具有易感染和高死亡率的特點。隨著養(yǎng)寵物人士逐漸增多，寵物貓的數(shù)量逐年增多，對于貓細(xì)小病防治備受重視。

目前對貓細(xì)小病毒的臨床主要治療手段采取對染病動物進(jìn)行大量注射抗病毒單克隆抗體。由于鼠源單克隆抗體注射至其他種源動物時易產(chǎn)生抗鼠源抗體導(dǎo)致治療效果大大降低限制臨床應(yīng)用。而且市售抗FPV抗體多為異種動物免疫血清，雖然能保護(hù)幼齡動物和成年動物免受感染，但無法連續(xù)注射，否則將造成劇烈的過敏反應(yīng)，嚴(yán)重時可導(dǎo)致動物死亡。進(jìn)化分析數(shù)據(jù)顯示，犬細(xì)小病毒(Canine parvo-virus，CPV)與FPV基因序列具有高同源性，VP2基因僅存在0.5％的差異性，有報道認(rèn)為它們可能來源于同一個祖先適應(yīng)不同的宿主進(jìn)化而來，本發(fā)明利用抗犬細(xì)小病毒的基因工程抗體可以良好的中和CPV，據(jù)其基因序列微小的差異性推測其同時可能中和FPV，起到抗體在不同種源動物間的交叉保護(hù)作用并通過試驗進(jìn)行證明。

目前，利用犬細(xì)小病毒單克隆抗體貓源化研究較少，為提高對FPV治療效果及降低抗體免疫原性的同時本發(fā)明開發(fā)的基因工程重組嵌合抗體，因此本發(fā)明將已獲得的抗犬細(xì)小病毒單克隆抗體的可變區(qū)基因與貓?zhí)烊豢贵w恒定區(qū)組裝，得到抗貓細(xì)小病毒的重組嵌合基因工程抗體，表現(xiàn)出良好的中和FPV病毒的活性，可應(yīng)用于犬細(xì)小病毒單克隆抗體貓源化研究等領(lǐng)域，對推動貓源化單克隆抗體藥物的發(fā)展具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種抗貓細(xì)小病毒抗體的貓源化基因工程抗體，能夠識別貓細(xì)小病毒，對貓細(xì)小病毒有較高的親和力，降低免疫原性。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種抗貓細(xì)小病毒的貓源化基因工程抗體，包括鼠源可變區(qū)和貓源化恒定區(qū)，其重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其重鏈恒定區(qū)基因序列如SEQID NO.5所示，其輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，其輕鏈恒定區(qū)基因序列如SEQ ID NO.6所示。

上述的抗貓細(xì)小病毒的貓源化基因工程抗體中，其重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，其輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

本發(fā)明所述的抗貓細(xì)小病毒鼠的貓源化基因工程抗體，可以是包含上述重鏈、輕鏈可變區(qū)和恒定區(qū)的單鏈抗體、雙鏈抗體、嵌合抗體、以及上述抗體的衍生物、功能等同物或同源物，以及抗體片段和含有抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的任何多肽。

本發(fā)明還提供了上述的抗貓細(xì)小病毒的貓源化基因工程抗體在制備治療貓細(xì)小病毒感染藥物方面的應(yīng)用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：