[發(fā)明專利]一種利用褪黑素促進(jìn)高光缺氮脅迫下微藻油脂積累的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201910523205.0 | 申請(qǐng)日： | 2019-06-17 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN110229755A | 公開（公告）日： | 2019-09-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 余旭亞;趙永騰 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 昆明理工大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N1/12 | 分類號(hào)： | C12N1/12;C12P7/64;C11B1/10;C11B3/16;C12R1/89 |
| 代理公司： | 北京眾澤信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11701 | 代理人： | 張艷萍 |
| 地址： | 650500 云南*** | 國省代碼： | 云南;53 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 黑素 藻細(xì)胞 誘導(dǎo) 微藻油脂 氮脅迫 單針 高光 母液 微藻 稀釋 藻液 生物技術(shù)領(lǐng)域 有機(jī)溶劑提取 葡萄糖 對(duì)數(shù)生長期 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 微藻生長 無水乙醇 異養(yǎng)培養(yǎng) 誘導(dǎo)培養(yǎng) 培養(yǎng)基 產(chǎn)業(yè)化 生物量 重懸浮 積累 配制 光照 生長 保證 | ||
1.一種利用褪黑素促進(jìn)高光缺氮脅迫下微藻油脂積累的方法，其特征在于：具體步驟如下：
(1)誘導(dǎo)藻液的制備：在溫度為24～26℃條件下，以10g/L葡萄糖為碳源的BG-11基礎(chǔ)培養(yǎng)基異養(yǎng)培養(yǎng)單針藻，待單針藻生長至對(duì)數(shù)生長期后期收集藻細(xì)胞，用缺氮的BG-11培養(yǎng)基稀釋重懸浮藻細(xì)胞至0.7g/L作為誘導(dǎo)藻液；
(2)誘導(dǎo)藻細(xì)胞積累油脂：用無水乙醇配制10mmol/L的褪黑素母液，將褪黑素母液添加到步驟(1)的誘導(dǎo)藻液中稀釋褪黑素濃度為10-80μmol/L，并置于溫度為24～26℃誘導(dǎo)培養(yǎng)；
(3)利用有機(jī)溶劑提取步驟(2)藻細(xì)胞內(nèi)的油脂。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用褪黑素促進(jìn)高光缺氮脅迫下微藻油脂積累的方法，其特征在于：單針藻為單針藻菌株Monoraphidium sp.QLY-1(NCBI：KM199735)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用褪黑素促進(jìn)高光缺氮脅迫下微藻油脂積累的方法，其特征在于：步驟(2)中光照強(qiáng)度為100～120μmol·m-2·s-1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用褪黑素促進(jìn)高光缺氮脅迫下微藻油脂積累的方法，其特征在于：步驟(3)中有機(jī)溶劑為氯仿-甲醇溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利用褪黑素促進(jìn)高光缺氮脅迫下微藻油脂積累的方法，其特征在于：所述氯仿-甲醇溶液中氯仿與甲醇的體積比為1:2。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利用褪黑素促進(jìn)高光缺氮脅迫下微藻油脂積累的方法，其特征在于：步驟(3)中提取藻細(xì)胞內(nèi)的油脂的方法為：將培養(yǎng)液經(jīng)5000r/min離心富集5min，用蒸餾水反復(fù)洗滌3次后凍干制成干藻粉，稱重；加入石英砂并研磨混勻，再加入氯仿-甲醇溶液重復(fù)抽提至藻體發(fā)白，離心收集有機(jī)相即得油脂；其中石英砂的質(zhì)量為干藻粉質(zhì)量的2倍。
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