[發明專利]一種改性活性炭固定化細胞增強細菌鉻還原能力的方法

有效

• 申請號: 201910519672.6
• 申請日: 2019-06-17
• 公開（公告）號: CN110241111B
• 公開（公告）日: 2023-06-09
• 發明（設計）人: 楊宇;程潛;高宇;胡婷婷;朱振宇;嵇宏杰
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N11/10;C12R1/265
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 吝秀梅

1.一種改性活性炭固定化細胞增強細菌鉻還原能力的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將活性炭破碎成粒徑大小為200目以上；

（2）將5g活性炭加入到含有50?ml?70%?HNO₃的燒瓶中，并在室溫下以170rpm攪拌1h以去除活性炭中的雜質，用去離子水洗至中性，最后充分干燥；將干燥后的活性炭加入100ml10%?w/v?PEI/甲醇溶液中，室溫下以170rpm攪拌24小時，然后立即將活性炭轉移到200ml1%?w/v的戊二醛溶液中進行交聯，最后用去離子水洗滌得到改性活性炭；

（3）配置LB液體培養基，搖瓶培養微球菌至對數生長期，取OD₆₀₀值為1.5的菌液，離心收集，用無菌水配置成10?ml細菌懸浮液；

（4)?稱量3g海藻酸鈉,和0.1,0.2,0.3,0.4或0.5g改性活性炭，加入90?ml蒸餾水體系，滅菌，將10?ml細菌懸浮液與其混和均勻，均勻滴入4%?w/v氯化鈣溶液中，室溫下靜置四小時，將洗滌后的小球倒入含有120?mg/L?Cr（Ⅵ）?LB液體培養基中，培養條件為初始pH?8.0，溫度30?℃，搖床轉速?170?rpm，培養84?h；配置二苯碳酰二肼溶液，0.2g二苯碳酰二肼，溶于50?ml丙酮，移至100?ml容量瓶，加水稀釋至刻度線，搖勻，向致冷溶液中徐徐依次加入12.5?ml濃H₂SO₄和12.5?ml濃磷酸，避光保存。

2.?根據權利要求1所述的改性活性炭固定化細胞增強細菌鉻還原能力的方法，其特征在于對步驟（4）所得二苯碳酰二肼溶液，采用二苯碳酰二肼分光光度法測定樣品中六價鉻的濃度，?Cr（Ⅵ）濃度的計算公式為y=0.6031x+0.0065，標準曲線的相關系數R²=0.0997。