[發明專利]一種腹瀉期適用的且具有免疫益智嬰幼兒乳制品

在審

• 申請號: 201910518246.0
• 申請日: 2019-06-15
• 公開（公告）號: CN110100895A
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: 李鐘
• 申請（專利權）人: 李鐘
• 主分類號: A23C9/13
• 分類號: A23C9/13;C07K14/335;C07K14/195;C12N15/31;C12R1/225;C12R1/01
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1.一種腹瀉期適用的的羊初乳制品，是通過下列步驟實現的：泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白的制備，抗原蛋白的免疫，免疫乳的收集，免疫乳制成乳制品。

2.根據權利要求1所述的適用于嬰幼兒腹瀉的羊初乳制品，其特征在于，所述的泡菜乳酸菌包括清酒乳酸菌、檸檬明串珠菌、冷明明串珠菌、乳酸明串珠菌、短乳桿菌、低溫乳桿菌、融合魏斯氏菌的一種或多種。

3. 根據權利要求1所述的適用于嬰幼兒腹瀉的羊初乳制品，其特征在于，所述泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示。

4. 根據權利要求1所述的適用于嬰幼兒腹瀉的羊初乳制品，其特征在于，所述的泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示，表達外源蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：所示。

5. 根據權利要求1所述的適用于嬰幼兒腹瀉的羊初乳制品，其特征在于，所述的泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示，表達外源蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：所示。

6.根據權利要求5所述的泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白的編碼基因，其特征在于，泡菜乳酸菌保護性抗原蛋白重組表達載體 pET28a-P41，是利用NcoI和XhoI酶切獲得SEQ IDNO: 2所示的核苷酸片段，并連接到pET28a 的NcoI與XhoI酶切位點之間所得，然后獲得的重組表達載體，導入到表達系統中誘導表達獲得所述泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白。

7.根據權利要求1所述的適用于嬰幼兒腹瀉的羊初乳制品，其特征在于，抗原蛋白的免疫 ：泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白與弗氏佐劑等體積混合，乳化，制成油包水疫苗；其中雙抗為10000單位的青霉和12500單位的鏈霉素組成的；維持液為80-100mL MEM細胞培養液和10-20mL標準羔羊血清組成的；

泡菜乳酸菌免疫保護性抗原蛋白免疫具體操作為：

在頸部肌肉注射或乳房周圍的皮下注射；第一次免疫用弗氏完全佐劑，以后用弗氏不完全佐劑代替完全佐劑進行免疫，抗原20mL與弗氏佐劑或弗氏不完全佐劑10mL混合，乳化，制成油包水疫苗，共30mL/頭/次；

第一次免疫 分娩前12周 30mL/頭/次

第二次免疫 分娩前8周 30mL/頭/次

第三次免疫 分娩前4周 30mL/頭/次。

8.根據權利要求1所述的適用于嬰幼兒腹瀉的羊初乳制品，其特征在于，免疫乳制成羊初乳制品有如下步驟：

（1）過濾和冷卻

將羊初乳直經過濾袋凈化原料初乳，然后再次加入泡菜乳酸菌，經冷排處理進入儲奶罐備用，儲奶罐溫度應保持在4-5℃，在儲奶罐中初乳存放時間不可超過40-48小時；

（2）標準化

為了保證產品質量的相對穩定，有必要調整不同批次間的免疫球蛋白含量以及效價，以使在加工前原料初乳中免疫球蛋白的含量大于10mg/mL，使得抗輪狀病毒羊初乳效價大于1：10000；

（3）預熱升溫

采用熱水循環式板式熱交換器將儲奶罐中的原料初乳的溫度升至35-45℃；

（4）脫脂

采用碟片式離心機離心脫脂，要求脫脂乳的含脂率控制在0.1％以下；

（5）預熱升溫，低溫巴氏滅菌

采用板式熱交換器將脫脂初乳升溫至55-65℃后，輸入保溫缸，在62℃保持40min，進行低溫巴氏滅菌；

（6）超濾濃縮

采用外壓式中空纖維超率濃縮設備進行循環式超濾濃縮,濃縮時物料溫度保持在50-55℃之間，待物料濃度達到20-23%，停止濃縮；

（7）低溫噴霧干燥

采用尼魯公司的低溫噴霧干燥設備，最大限度地保持初乳中免疫球蛋白的活性；低溫噴霧干燥過程的參數如下：進風溫度160℃；流化床溫度60℃；出料溫度62℃；流化床溫度60℃；旋風分離器出口溫70℃；塔內負壓0.5mmH2O；旋風分離器壓差50mmH2O；流化床壓差45mmH2O；

（8）獲得羊初乳制品

最后將經過低溫噴霧干燥的羊初乳，加入IgG免疫球蛋白、乳球蛋白、乳鐵蛋白，根據生產需要制成各種羊初乳制品，IgG免疫球蛋白含量大于3500mg。