[發明專利]PD-L1免疫組化試劑盒

在審

• 申請號: 201910514277.9
• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN110275025A
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發明（設計）人: 徐軍;李興民;嚴旭霞
• 申請（專利權）人: 浙江數問生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/574;G01N21/78
• 代理公司: 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙) 11400
• 代理人: 鄔玥;方挺

本發明涉及檢測人組織特別是人腫瘤組織中PD?L1蛋白表達的免疫組化試劑和試劑盒及其制備方法和應用。

技術背景

程序性死亡分子1(PD-1)主要表達于活化的T淋巴細胞、B淋巴細胞和巨噬細胞表面。程序性死亡分子1配體-1(PD-L1)，又稱B7同源分子1(B7-H1)是PD-1的配體，屬于I型跨膜蛋白。PD-L1與PD-1結合后，由PD-1傳遞抑制性信號，能夠抑制淋巴細胞的增殖和活化。近幾年發現，一些病人的腫瘤細胞表面高度表達PD-L1，通過與腫瘤浸潤淋巴細胞表面的PD-1分子結合，抑制淋巴細胞的功能，從而導致腫瘤發生免疫逃逸。臨床實驗研究表明，阻斷PD-1或PD-L1可以有效地治療或抑制腫瘤生長。因此，臨床上需要簡便易行的檢測手段篩選出腫瘤組織或細胞高度表達PD-L1的腫瘤患者，為個性化地進行阻斷PD-1或PD-L1的治療提供指導和依據。

附圖簡介

圖1是用6E8和MS-1215組合對人胎盤組織進行免疫組化染色結果。

圖2是用6E8和859643組合對人胎盤組織進行免疫組化染色結果。

圖3是用6E8和ENS004組合對人胎盤組織進行免疫組化染色結果。

圖4是用6E8和KIT-5010組合對人胎盤組織進行免疫組化染色結果。

圖5是用RIgG和MS-1215組合對人胎盤組織進行免疫組化染色結果。

圖6是用6E8和MS-1215組合對人肺鱗癌組織進行免疫組化染色結果。

圖7是用圖6的對人肺鱗癌組織進行免疫組化陰性對照染色結果。

發明概要

本發明涉及一種PD-L1免疫組化試劑盒，用于檢測人組織中，特別是人腫瘤組織中PD-L1蛋白的表達。免疫組化試劑盒一般至少包括用于特異性結合目的標記蛋白的一抗和結合一抗的帶有可以被檢測出的標記的二級抗體，這兩種抗體的組合配對至關重要，找到一個最佳組合是開發一個優質免疫組化產品的關鍵。發明人針對抗人PD-L1抗體(一抗)和二抗進行了大量的試驗，篩選了無數的組合，經過了反復的失敗，終于找到了幾個最佳組合，進而開發出了特異性強、靈敏度高的PD-L1免疫組化試劑盒。

因此，一方面，本發明的PD-L1免疫組化試劑盒至少包括(1)抗人PD-L1抗體；和(2)可以和所述抗人PD-L1抗體結合的并帶有可以被檢測出的標記的二級抗體。其中抗人PD-L1抗體可以是鼠單抗、鼠多抗、兔單抗或兔多抗。已知的可以選用的抗人PD-L1抗體包括AbcamAnti-PD-L1antibody 28-8貨號ab205921、AbcamAnti-PD-L1antibody貨號ab58810、AbcamAnti-PD-L1antibody貨號ab153991、AbcamAnti-PD-L1抗體MIH2貨號ab109052、Thermo Fisher PD-L1/CD274Antibody貨號PA5-20343、Thermo Fisher PD-L1/CD274Antibody貨號PA5-30937、Thermo Fisher PD-L1/CD274Antibody貨號PA5-28115、AbDSerotec Rabbit anti Human CD274貨號AHP1703、AbDSerotec Goat anti HumanCD274(C-Terminal)貨號AHP2128、MicroSpin(微旋)Anti-PD-L1 6E8(貨號MS-1028)、Spring bioscience PD-L1/CD274SP142貨號M4420、Cell Signaling TechnologyPD-L1Rabbit mAb貨號13684、Cell Signaling Technology PD-L1(405.9A11)Mouse mAb貨號29122、Dako 28-8以及Dako 22C3。