[發明專利]腎病綜合征病變進程相關代謝標志物及其應用

有效

• 申請號: 201910509827.8
• 申請日: 2019-06-13
• 公開（公告）號: CN110286189B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 秦雪梅;楊柳;李愛平;張王寧;張麗增
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N33/487
• 代理公司: 太原晉科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 鄭晉周;翟沖燕

本發明屬腎病綜合征標志物篩選鑒定技術領域，提供一種腎病綜合征病變進程相關代謝標志物及其應用。雙（4?乙基芐基）山梨醇,C16二氫鞘氨醇,溶血磷脂酰乙醇胺(22:6),溶血磷脂酰膽堿(22:5),N?乙醇胺,脯氨酸為進展性標志物；油酸酰胺，二十二碳六烯酸，14S?羥基?二十二碳六烯酸，二十二碳五烯酸，尿酸，溶血磷脂酰膽堿(20:5)和(18:1)為早期標志物；酰基肉毒堿C18:0，亞油酸肉堿，溶血磷脂酰膽堿(18:3)，DL?色氨酸，吲哚丙烯酸，對甲酚硫酸鹽，3?吲哚硫酸鹽，胞嘧啶，肌酸酐，鞘氨醇?1?磷酸，L?蘇式?二氫鞘氨醇和神經酰胺(d18:0/14:0)為晚期標志物。可量化，快速靈敏度高、特異性強。

技術領域

本發明屬于腎病綜合征標志物篩選鑒定技術領域，具體涉及腎病綜合征病變進程相關代謝標志物及其應用。具體而言，利用兩種阿霉素腎病模型和LC-MS技術分析獲得的與腎病綜合征病變進程相關的標志物及其在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的用途。

背景技術

腎病綜合癥表現出大量蛋白尿，低蛋白血癥和高脂血癥的癥狀，是由于各種病因導致的腎小球濾過膜通透性發生改變的一個癥候群，且腎病綜合征為兒童多發難治性疾病，發病率高，嚴重影響人類健康。臨床診斷主要依據尿蛋白定量以及血漿白蛋白水平；具體病理依據需要依據腎穿刺組織病理進行判斷。診斷依據前者專屬性差，后者病人依從性差，對該病的治療和預后都非常不利，因而建立非入侵快速診斷方法非常重要，尤其尋找能夠作為反映腎病綜合征病變進程的潛在病理標志物，對減緩腎功能的惡化，預防并發癥尤為關鍵。

阿霉素誘導的大鼠腎病模型是公認的模擬人類腎臟疾病的動物模型，其臨床表現接近腎病綜合征的特征。實驗中可依據24 h尿蛋白定量判斷腎病綜合征模型復制成功與否，而腎病的病理類型及病變程度主要依據腎組織病理學檢查，不僅主觀性強且耗時耗力，目前尚無腎病綜合征病變進程動態評價方法，因而需要建立一種整體非入侵、快速、高靈敏度、專屬性好的可用于腎病診斷以及動態反映疾病的病程的方法。

代謝組學以其不斷增加的覆蓋范圍及其內在的高通量能力在許多領域中得到應用，如疾病診斷和治療，藥物毒性研究，生物標志物發現以及疾病機制探索等。因而，采用阿霉素大鼠腎病模型模擬腎病綜合征，結合LC-M代謝組學技術與數理統計方法尋找與腎病綜合征病變進程相關的潛在標志物，以期尋找與腎病綜合征發病進程相關的潛在病理標志物，為該病診斷、治療及預后提供研究基礎。

發明內容

本發明為了解決現有技術不能確定腎病綜合征病變進程的缺點，提供了一種腎病綜合征病變進程相關代謝標志物及其應用。

本發明由如下技術方案實現的：一種腎病綜合征病變進程相關代謝標志物，所述代謝標志物為雙（4-乙基芐基）山梨醇，C16二氫鞘氨醇，溶血磷脂酰乙醇胺(22:6)，溶血磷脂酰膽堿(22:5)，N-乙醇胺，脯氨酸作為進展性標志物；油酸酰胺，二十二碳六烯酸，14S-羥基-二十二碳六烯酸，二十二碳五烯酸，尿酸，溶血磷脂酰膽堿(20:5)和溶血磷脂酰膽堿(18:1) 作為早期標志物；酰基肉毒堿 C18:0，亞油酸肉堿，溶血磷脂酰膽堿(18:3)，DL-色氨酸，吲哚丙烯酸，對甲酚硫酸鹽，3-吲哚硫酸鹽，胞嘧啶，肌酸酐，鞘氨醇-1-磷酸，L-蘇式-二氫鞘氨醇和神經酰胺(d18:0/14:0)作為晚期標志物。

所有代謝標志物中，以神經酰胺(d18:0/14:0)為例，d表示結構式中有兩個羥基，N原子連接兩個長碳鏈，一個有18個碳上面有0個雙鍵（即18:1）；另一個有12個碳，上面沒有雙鍵（即14:0）。

篩選所述的一種腎病綜合征病變進程相關代謝標志物的方法，步驟如下：

（1）兩種阿霉素腎病模型的復制與傳統評價：將大鼠隨機分為空白對照組，早期阿霉素腎病模型組和晚期阿霉素腎病模型組，早期阿霉素腎病模型組和晚期阿霉素腎病模型組采用尾靜脈注射阿霉素進行誘導，建立阿霉素腎病模型；利用腎組織病理損傷程度與尿蛋白定量水平對阿霉素腎病模型進行評價；