[發明專利]一種用于檢測肥胖和2型糖尿病的引物、探針組合物及其應用方法

在審

• 申請號: 201910503415.3
• 申請日: 2019-06-11
• 公開（公告）號: CN110305952A
• 公開（公告）日: 2019-10-08
• 發明（設計）人: 張幫周;林愛強;姜濤;柯棟賢;林晨怡;楊璐溪
• 申請（專利權）人: 廈門藍特生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
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本發明提供了用于檢測肥胖和2型糖尿病的引物、探針組合物，包括針對ADRβ3基因上rs4994位點的引物和探針、針對CDKAL1基因上rs9465871位點的引物和探針，針對ADRβ3基因上rs4994位點的引物和探針包括：ADRβ34994的上游引物、ADRβ34994的下游引物；ADRβ34994的探針；針對CDKAL1基因上rs9465871位點的引物和探針包括：CDKAL1的上游引物；CDKAL1的下游引物；CDKAL1的探針。本發明提供一種檢測便捷、準確率高、經濟實惠的肥胖和2型糖尿病相關突變基因位點的檢測方法；通過多組基因引物對樣品DNA進行實時定量PCR擴增，并通過探針分型獲取受檢者的基因型，達到快速檢測肥胖和2型糖尿病易感基因突變位點的效果。

技術領域

本發明涉及分子生物學檢測領域，具體地說，涉及Q-PCR法檢測肥胖和2型糖尿病易感基因的突變位點的擴增引物和探針及其應用。

背景技術

肥胖作為一種常見的營養代謝性疾病，是指機體脂肪總含量過多和（或）局部體脂含量過多，主要是由遺傳和環境因素共同作用所形成的慢性代謝性疾病。隨著生活方式的改變，肥胖的患病率呈快速上升趨勢，并且已經成為全球性公共衛生問題。2002 年WHO 將肥胖列為造成人類疾病負擔的全球一級風險因素之一，目前中國已經超越美國成為全球肥胖人口數最多的國家，因此預防肥胖癥的流行也是未來一段時間世界各國面臨的最大公共衛生挑戰之一。

2型糖尿病是一種長期的代謝紊亂疾病，主要表現是高血糖、胰島素抵抗和相對缺乏胰島素。多由機體遺傳因素和外界環境因素相互作用導致，在病發過程中由多基因參與、多步驟引發。此外，與肥胖隊伍迅速擴大趨勢一致的是，2型糖尿病人群也隨之壯大。因此，目前肥胖已被看作是危害健康和發生糖尿病的主要危險因素。由于肥胖可引起胰島素抵抗，也可造成胰島素的分泌障礙，從而影響胰島素調節血糖的作用，使血糖升高，進而發生糖尿病，因此肥胖或超重的人比體重保持正常的人更易患糖尿病。2型糖尿病的肥胖患者減輕體重不僅有利于血糖的控制，還可減少并發癥的發生。因此，要想控制2型糖尿病及其相關并發癥，解決肥胖問題勢在必行。許多研究發現，肥胖患者的體型與2型糖尿病更具相關性，而且與肥胖有協同作用。因此提高人們對肥胖和2型糖尿病的認識，以及對其發病機理和防治的研究，已成為當今社會重要的健康問題。

肥胖和糖尿病的病因相當復雜，研究表明遺傳因素在肥胖和糖尿病的發生機制中發揮著極為重要和關鍵的作用，并且研究還發現肥胖和糖尿病是多基因遺傳病。隨著肥胖候選基因研究的不斷深入，目前已經發現超過600 多個基因位點與肥胖癥的發生有關，得到廣泛證實的與體重調節密切相關的基因如體脂量和肥胖癥相關（FTO）基因、瘦素受體（LEPR）基因、黑皮質素-4受體（MC4R）基因、解偶聯蛋白（UCP2）基因、β3-腎上腺素能受體（ADRB3）基因、過氧化物酶增殖活化受體γ（PPARγ2）基因等。同時，已報道的超過100多個2型糖尿病易感基因/位點，其中在不同種族和人群中得到反復驗證的易感基因主要包括：細胞周期素依賴激酶（CDK）5 調節亞單位相關蛋白1類似物1CDK5（CDKAL1）、轉錄因子7類似物2（TCF7L2）、胰島素樣生長因子2mRNA結合蛋白（IGF2BP2）、內向整流鉀通道亞家族成員11（KCNJ11）、褪黑素受體1B（MTNR1B）和肥胖基因（FTO）等。目前，僅針對肥胖或糖尿病展開檢測，該方法只能提示某一患病風險。此外，其他基于測序的方法要求樣本量多，耗時長，不方便靈活開展檢測?；诖耍景l明提供聯合檢測肥胖和2型糖尿病易感基因突變位點的引物和探針組合，采用Q-PCR探針法，檢測高效、靈活，在一定程度上對肥胖和2型糖尿起到篩查作用，也對含有易感基因突變的受檢者起到一定的提示作用。

發明內容

本發明提供聯合檢測肥胖和2型糖尿病易感基因突變位點的引物和探針組合，采用Q-PCR探針法，檢測高效、靈活，在一定程度上對肥胖和2型糖尿起到篩查作用，也對含有易感基因突變的受檢者起到一定的提示作用。