[發(fā)明專利]一種化妝品中過敏原檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910495828.1
• 申請日: 2019-06-10
• 公開（公告）號: CN110174488B
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李兆杰;鞠玲燕;高飛;徐成鋼;劉玉敏;魏瑋
• 申請（專利權(quán)）人: 青島農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 威海聚睿知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37352
• 代理人: 丁宏斌

1.一種化妝品中過敏原檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)建立過敏原數(shù)據(jù)庫；

(2)待測樣品的處理；

(3)檢測：采用超高效液相色譜-靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜進行檢測，所述超高效液相色譜條件為：色譜柱：ZORBAX Eclipse Plus C18；流動相A為甲醇，流動相B為5mmol/L的乙酸銨水溶液，梯度洗脫程序；所述質(zhì)譜的條件為：電噴霧離子源；正負離子掃描；離子源溫度：350℃；噴霧電壓：正離子模式3.5kV，負離子模式3.0kV；

所述過敏原為香料類過敏原、防腐劑類過敏原、染發(fā)成分類過敏原；

所述步驟(1)用甲醇和2g/L抗壞血酸水溶液，1∶1，v/v，配置過敏原物質(zhì)的混合標準品溶液，同分異構(gòu)體單獨配置單標溶液，采用正負離子切換FullMS/ddMS2掃描方式分析，獲得多種過敏原物質(zhì)的保留時間、一級母離子和二級碎片離子精確質(zhì)量數(shù)，構(gòu)建過敏原物質(zhì)數(shù)據(jù)庫；

所述步驟(2)具體為準確稱取待測樣品0.25g至50mL離心管中，加入25mL甲醇和2g/L抗壞血酸水溶液，1∶1，v/v，渦旋1min，超聲提取15min，10000r/min離心5min，移取上清液過0.22μm微孔濾膜，上機檢測；蠟質(zhì)含量較高、油包水類樣品先加入5mL正己烷分散均勻后，再渦旋超聲提取；

所述步驟(3)中液相色譜流速：0.3mL/min；柱溫：30℃；梯度洗脫條件：0～1min 10％A，2～6min 10％～50％A，6～8min 50％～60％A，8～16min 60％A，16～18min 60％～10％A，18～20min 10％～90％A，20～26min 90％A，26～29min 90％～10％A，29～30min 10％A；

所述香料類過敏原為苧烯、苯甲醇、芳樟醇、香茅醇、香葉醇、羥基香茅醛、丁香酚、異丁香酚、α-異甲基紫羅蘭酮、鈴蘭醛、新鈴蘭醛、已基肉桂醛、苯甲酸芐酯、水楊酸芐酯、肉桂酸芐酯、戊基肉桂醛、肉桂醇檸檬醛、肉桂醛、香豆素；

所述防腐劑類過敏原為甲基異噻唑啉酮、甲基氯異噻唑啉酮、重氮烷基脲、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸異丙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸異丁酯、對羥基苯甲酸丁酯、水楊酸、苯甲酸、山梨酸；

所述染發(fā)成分類過敏原為間苯二酚、甲苯-2，5-二胺硫酸鹽、對苯二胺、對氨基苯酚、間氨基苯酚、2-氨基-3羥基吡啶、4-氯間苯二酚、4-氨基-2-羥基甲苯、2，4-二氨基苯氧基乙醇鹽酸鹽、N，N-雙(2-羥乙基)對苯二胺硫酸鹽、2-氯對苯二胺硫酸鹽、2-甲基間苯二酚、6-氨基間甲酚、苯基甲基吡唑啉酮、4-氨基-3-硝基苯酚、4-氨基間甲酚、對甲基氨基苯酚硫酸鹽、4-硝基鄰苯二胺、2，6-二氨基吡啶、6-羥基吲哚、2，7-萘二酚、N-苯基對苯二胺、1，5-萘二酚或1-萘酚。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征是質(zhì)譜的母離子、二級碎片離子參數(shù)如下：

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征是還包括定性篩查方法的建立：利用TraceFinder軟件將(1)中建立的數(shù)據(jù)庫導入后，設(shè)置篩查參數(shù)，包括保留時間偏差設(shè)為30s、母離子精確質(zhì)量數(shù)質(zhì)量偏差閾值設(shè)為5ppm、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)質(zhì)量偏差閾值設(shè)為10ppm，建立定性篩查方法，將樣品通過高分辨質(zhì)譜分析獲得的信息與譜庫相關(guān)信息匹配。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征是還包括定量分析方法的建立：以一級母離子作為定量離子，建立定量分析方法，以外標法定量。