[發明專利]一種氮摻雜四氧化三鐵過氧化物模擬酶及其檢測葡萄糖的方法在審
| 申請號： | 201910476129.2 | 申請日： | 2019-06-03 |
| 公開（公告）號： | CN110160975A | 公開（公告）日： | 2019-08-23 |
| 發明（設計）人： | 邴欣;賈敏;賀祥柯;沙雋伊;李志華 | 申請（專利權）人： | 山東省產品質量檢驗研究院 |
| 主分類號： | G01N21/31 | 分類號： | G01N21/31;G01N1/28;G01N1/38;B01J19/00;C01G49/08;B82Y30/00;B82Y40/00 |
| 代理公司： | 青島高曉專利事務所(普通合伙) 37104 | 代理人： | 杜亞男 |
| 地址： | 250000 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 模擬酶 過氧化物模擬酶 葡萄糖 檢測葡萄糖 四氧化三鐵 氮摻雜 催化氧化葡萄糖 過氧化物酶活性 分析化學技術 葡萄糖氧化酶 催化活性 催化效率 含氮物質 快速檢測 實際樣品 修飾合成 氮元素 檢出限 修飾物 親和力 氫鍵 催化 尿素 引入 研究 | ||
1.一種氮摻雜四氧化三鐵過氧化物模擬酶，其特征在于：各重量組分為：六水合三氯化鐵2-4份、乙二醇85-90份、聚乙二醇1.5-3.0份、尿素1.0-4.0份、無水乙醇90-120份。
2.根據權利要求1所述的氮摻雜四氧化三鐵過氧化物模擬酶，其特征在于：制備工藝包括以下步驟：
（1）按重量組分稱取六水合三氯化鐵、尿素、聚乙二醇和乙二醇；六水合三氯化鐵、尿素、聚乙二醇加入乙二醇中，攪拌拌均勻，然后加入到水熱合成反應釜中，置于200-260 ℃干燥箱中反應5-24 h；
（2）然后將步驟（1）反應后的產物轉移到盛有無水乙醇溶液的燒杯中，利用超聲在無水乙醇溶液中將合成的顆粒進行分散，時間為6 min，然后進行磁分離，棄去上清液；
（3）再用去離子水將步驟（2）中棄去上清液的產物清洗3次，并用去離子水重新分散后保存，即得不同修飾物不同濃度的Fe3O4納米模擬酶。
3.一種氮摻雜四氧化三鐵過氧化物模擬酶檢測葡萄糖的方法，其特征在于：其步驟工藝為：
（1）預處理：將葡萄糖溶液通過離心、超濾的方法進行預處理；
（2）稀釋：利用pH為 3.0-4.5緩沖體系稀釋預處理后的葡萄糖溶液至所需濃度備用；
（3）水浴：取經步驟（2）稀釋后的溶液50 μL，并加入10 mL pH 為7.0的磷酸鹽緩沖液中，加入5 μL40 mg/mL葡萄糖氧化酶，37 ℃水浴20-60分鐘，得反應液；
（4）測定：取30 μL反應液于2.4 mL pH為 3.0-4.5緩沖體系中，然后依次加入120 μL濃度為10 mg/mL的四甲基聯苯胺（TMB）、240μL濃度為2 mg/mLN- Fe3O4的納米模擬酶，混勻，30-50 ℃水浴20 min，待反應結束后于652 nm波長處測定吸光度值。
4.根據權利要求3所述的氮摻雜四氧化三鐵過氧化物模擬酶檢測葡萄糖的方法，其特征在于：所述的步驟（2）中稀釋后的葡萄糖溶液的濃度為5 ×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3、5×10-3和1×10-2mol/L。
5.根據權利要求3所述的氮摻雜四氧化三鐵過氧化物模擬酶檢測葡萄糖的方法，其特征在于：所述的緩沖體系為醋酸鹽緩沖體系、碳酸鹽緩沖體系和磷酸鹽緩沖體系；所述的磷酸鹽緩沖液為磷酸鈉緩沖液。
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