[發(fā)明專利]一種大麻HPLC指紋圖譜測(cè)定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910463271.3
• 申請(qǐng)日: 2019-05-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110133148A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚昕;張景;孫武興;王曙賓;邢俊波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 漢義生物科技（北京）有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 北京領(lǐng)科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N大麻HPLC指紋圖譜測(cè)定方法，其特征在于，包括如下步驟：(1)供試品溶液的制備：取大麻藥材，粉碎，過(guò)篩，烘烤，取烘烤后的大麻藥材粉末精密稱定，加入提取劑，超聲提取，放至室溫，過(guò)微孔濾膜，取續(xù)濾液即得；(2)對(duì)照品溶液的制備：分別取大麻二酚酸、次大麻二酚、大麻萜酚、大麻二酚、Δ9?四氫化次大麻酚、大麻環(huán)萜酚、四氫大麻酚、香葉基黃酮A對(duì)照品，加入甲醇溶解，制成對(duì)照品溶液；(3)測(cè)定方法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液注入高效液相色譜儀，測(cè)定，并記錄色譜圖。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥品檢測(cè)和HPLC檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明提供了一種大麻HPLC指紋圖譜測(cè)定方法。

背景技術(shù)

大麻Cannabis sativa L.，又名火麻、漢麻、線麻、胡麻、野麻，為桑科一年生草本植物。大麻中含有大麻酚類化合物及其衍生物、黃酮及其苷類化合物、生物堿類化合物、香豆素類化合物、萜類及甾醇類化合物、脂肪酸類化合物、菲類化合物及其他化合物。大麻酚類成分是大麻花葉的主要活性成分，主要包括THC(tetrahydrocannabinol，四氫大麻酚)、CBD(cannabidiol，大麻二酚)、CBC(cannabichromene，大麻環(huán)萜酚)、CBN(cannabinol，大麻酚)、CBG(cannabigerol，大麻萜酚)及其丙基同系物THCV、CBDV、CBCV和CBGV等。這些大麻酚類成分與固體成分的分離性能、溶解性、提取條件均有差別，同一樣品處理方式下同一樣品各大麻酚類成分的含量也經(jīng)常出現(xiàn)差異，在不同批次樣品中差異經(jīng)常更為顯著。

目前對(duì)大麻的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法單一，主要為采用HPLC-UV來(lái)檢測(cè)大麻中大麻多酚的含量。HPLC指紋圖譜的測(cè)定方法已經(jīng)廣泛用于中藥材、植物的測(cè)定，但由于上段所述的原因，HPLC指紋圖譜用于大麻一直存在圖譜擬合度差、測(cè)定效果不穩(wěn)定的問(wèn)題，因此其不足以系統(tǒng)、完整地評(píng)價(jià)大麻的質(zhì)量。尋找能實(shí)現(xiàn)各大麻酚類成分普遍、穩(wěn)定提取的方法進(jìn)而建立可靠的大麻HPLC指紋圖譜測(cè)定方法，從整體上對(duì)大麻質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)，在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)價(jià)、食品藥品檢驗(yàn)中均有需求。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明旨在提供一種大麻HPLC指紋圖譜測(cè)定方法，其能有效地反映大麻的質(zhì)量，有利于對(duì)大麻進(jìn)行整體監(jiān)控，避免了質(zhì)量控制的單一性和片面性。該方法穩(wěn)定、可靠。

一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N大麻HPLC指紋圖譜測(cè)定方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)供試品溶液的制備：取大麻藥材，粉碎，過(guò)篩，烘烤，取烘烤后的大麻藥材粉末精密稱定，加入提取劑，超聲提取，放至室溫，過(guò)微孔濾膜，取續(xù)濾液即得；

(2)對(duì)照品溶液的制備：分別取CBDA、CBDV、CBG、CBD、THCV、CBC、THC、香葉基黃酮A對(duì)照品，加入甲醇溶解，制成對(duì)照品溶液；

(3)測(cè)定方法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液注入高效液相色譜儀，測(cè)定，并記錄色譜圖。

進(jìn)一步地，步驟(1)中所述大麻藥材為7-9月采摘的成熟工業(yè)大麻藥材。

進(jìn)一步地，步驟(1)中所述大麻藥材選自：大麻葉、大麻花、大麻根、大麻秸稈和大麻種子中的一種或兩種以上以任意比例的組合；優(yōu)選地，所述大麻藥材為大麻花和/或大麻葉。

進(jìn)一步地，步驟(1)中所述大麻藥材烘烤的溫度為100-140℃(如100、110、115、120、125、130、140℃)；在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述烘烤溫度為120℃。

進(jìn)一步地，步驟(1)中所述大麻藥材烘烤的時(shí)間為60-150分鐘(如60、80、90、100、120、150分鐘)；在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述烘烤時(shí)間為90分鐘。

進(jìn)一步地，步驟(1)中所述提取劑為有機(jī)溶劑，其中所述有機(jī)溶劑可選自：乙醇、甲醇、異丙醇、乙酸乙酯和丙酮中的一種或兩種以上以任意比例的組合。