[發明專利]浦東白豬及生肉制品的SNP標記組合和鑒定方法

有效

• 申請號: 201910463234.2
• 申請日: 2019-05-30
• 公開（公告）號: CN110106263B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 王起山;潘玉春;岳陽
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 劉靜;邱啟旺

本發明公開了一種浦東白豬及生肉制品的SNP標記組合和鑒定方法，通過提取生豬肉或肉制品的基因組DNA，經PCR擴增后進行瓊脂糖凝膠電泳和Sanger測序，根據測序結果特點位點的SNP基因型鑒定浦東白豬及其肉制品；所述的Sanger測序，其鑒定位點為：pig18?52722267、pig8?146130825、pig9?10041850和pig13?213464983位點處出現特異突變；本發明解決現有技術中尚未有浦東白豬及其肉制品相關的鑒定方法的問題。

技術領域

本發明涉及的是一種食品安全監測領域，具體涉及一種浦東白豬及生肉制品的SNP標記組合和鑒定方法。

背景技術

浦東白豬主要分布在上海南匯及川沙等地。其特點是繁殖率高，性成熟早，平均每胎產仔12頭左右，閹割后，安靜少動，適合軟圈飼養，50年代前，是川沙縣的當家品種。其因肉質鮮美，稱為“糯豬”而廣受消費者歡迎。浦東白豬體型外貌與西方長白豬和大白豬相似，在生產中存在用西方豬種冒充浦東白豬的情況。另一方面，浦東白豬分布區域與太湖豬種(二花臉豬、梅山豬、楓涇豬、沙烏頭豬、米豬、嘉興黑豬)分布區域有重合，生產中存在混淆的情況。通過傳統方法將浦東白豬與其他品種豬區分難度很大，尤其是宰殺后的分割豬及其處理后的肉制品。隨著測序技術的發展，分子標記也由一代的限制性片段長度多態性(RFLP)，第二代的數目可變串聯重復多態性(SSR)，發展到了單核苷酸多態性(SNP)。第三代分子標記SNP相對于前兩代分子標記具有變異豐富、對DNA樣本要求低、穩定性高、測定準確、檢測方法簡便且通量高等優點。目前，第三代分子標記SNP已廣泛應用于親子鑒定、動植物品種(品系)鑒定、遺傳育種等領域。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提出一種鑒定浦東白豬及生肉制品的SNP標記組合和鑒定方法，利用第三代分子標記鑒別及Sanger測序技術鑒別浦東白豬及生肉制品，解決現有技術中尚未有浦東白豬及其肉制品相關的鑒定方法的問題，提供了一種結果準確、操作簡單、價格低廉的鑒定浦東白豬及其肉制品的方法和相關專用引物。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

一種浦東白豬及生肉制品的SNP標記組合，包括：pig18-52722267、pig8-146130825、pig9-10041850和pig13-213464983，所述pig18-52722267表示豬18號染色體第52722267位位點，pig8-146130825表示豬8號染色體第146130825位位點，pig9-10041850表示豬9號染色體第10041850位位點，pig13-213464983表示豬13號染色體第213464983位位點。

進一步地，基于SNP標記組合的浦東白豬及其生肉制品鑒定方法，首先提取待鑒定的生豬肉或肉制品的基因組DNA，然后經PCR擴增后進行瓊脂糖凝膠電泳和Sanger測序，得到SNP標記組合各個檢測位點的信息，當SNP標記組合任意三個位點處出現特異突變，即可鑒定為浦東白豬及其肉制品。

進一步地，所述的PCR擴增，pig18-52722267處的上下游引物的序列如SEQ IDNO.1～2所示，pig8-146130825處的上下游引物的序列如SEQ ID NO.3～4所示，pig9-10041850處的上下游引物的序列如SEQ ID NO.5～6所示，pig13-213464983處的上下游引物的序列如SEQ ID NO.7～8所示。

進一步地，測序產物鑒定位點對比信息如下表所示：