[發(fā)明專利]一種面膜中透明質(zhì)酸含量的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910452431.4
• 申請(qǐng)日: 2019-05-28
• 公開（公告）號(hào): CN110045045B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱耀輝;徐文娟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山市天然保貿(mào)易有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣東中億律師事務(wù)所 44277
• 代理人: 杜海江

本發(fā)明公開了一種面膜中透明質(zhì)酸含量的檢測(cè)方法，包括分別在透明質(zhì)酸?TRC和面膜樣品中添加稀釋劑溶解成對(duì)照溶液和試樣溶液，其中稀釋劑為20%的0.05mol/L甲酸胺水溶液與80%的甲醇混合的流動(dòng)相，然后向HPLC儀分別注入15?25μL的對(duì)照溶液和試樣溶液，通過示差折光檢測(cè)器檢測(cè)，得到透明質(zhì)酸的峰面積后計(jì)算試樣溶液中透明質(zhì)酸的含量，本發(fā)明通過設(shè)置最佳比例的流動(dòng)相溶液，使用三氟乙酸調(diào)整流動(dòng)相最佳pH為4.00，設(shè)置流動(dòng)相最佳流速為1.0ml/min，使用普通示差折光檢測(cè)器，使得本發(fā)明的透明質(zhì)酸的保留時(shí)間縮短為10?15min內(nèi)，在對(duì)面膜中的透明質(zhì)酸含量進(jìn)行大批量檢測(cè)時(shí)，可以縮短總的檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)，減少流動(dòng)相溶液的用量，提高檢測(cè)效率，減少檢測(cè)成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及透明質(zhì)酸的檢測(cè)領(lǐng)域，特別是一種面膜中透明質(zhì)酸含量的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

目前透明質(zhì)酸常用的檢測(cè)方法為HPLC法，其中流動(dòng)相的選擇通常為KCl-磷酸鹽緩沖液，此種方法中透明質(zhì)酸的保留時(shí)間通常為20min左右，若用于大批量的透明質(zhì)酸檢測(cè)時(shí)間消耗較長(zhǎng)，同時(shí)因?yàn)闄z測(cè)時(shí)間變長(zhǎng)而導(dǎo)致流動(dòng)相溶液的用量將增加，檢測(cè)成本也將增加；另外目前檢測(cè)方法通常使用ELSD或CAD檢測(cè)器，較為麻煩，導(dǎo)致檢測(cè)成本提高。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種快速準(zhǔn)確、檢測(cè)成本低的面膜中透明質(zhì)酸含量的檢測(cè)方法。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

一種面膜中透明質(zhì)酸含量的檢測(cè)方法:

(1)對(duì)照溶液的制備：在透明質(zhì)酸-TRC中添加稀釋劑溶解成濃度為0.4-0.6mg/ml的對(duì)照溶液，所述稀釋劑為流動(dòng)相，所述流動(dòng)相為20％的0.05mol/L甲酸胺水溶液與80％的甲醇的混合溶液；

(2)試樣溶液的制備：在面膜樣品中添加所述稀釋劑溶解成濃度為450-550mg/ml的試樣溶液；

(3)所述試樣溶液中透明質(zhì)酸的含量的測(cè)定：HPLC儀中設(shè)置有色譜柱與進(jìn)樣器，采用所述進(jìn)樣器向HPLC儀分別注入15-25μL的所述對(duì)照溶液和試樣溶液，通過示差折光檢測(cè)器檢測(cè)，分別記錄所述對(duì)照溶液和試樣溶液中所述透明質(zhì)酸的峰面積，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算得到所述試樣溶液中透明質(zhì)酸的含量。

本發(fā)明設(shè)置的所述流動(dòng)相比例為20％的0.05mol/L甲酸胺水溶液與80％的甲醇，與所述流動(dòng)相的最佳pH值為4.00結(jié)合，使得透明質(zhì)酸的保留時(shí)間控制在10-12min內(nèi)，大大縮小了檢測(cè)時(shí)間，減少了流動(dòng)相的使用量，降低了使用成本。本發(fā)明使用所述示差折光檢測(cè)器，更為簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本降低。

所述流動(dòng)相通過三氟乙酸調(diào)節(jié)溶液pH為3.50-4.50。所述流動(dòng)相中的三氟乙酸可改善峰形、克服峰展寬和拖尾問題，所述三氟乙酸與透明質(zhì)酸的正電荷及極性基團(tuán)相結(jié)合以減少極性保留以及屏蔽所述透明質(zhì)酸上殘留的極性表面，而且由于所述三氟乙酸的紫外最大吸收峰低于200nm，對(duì)所述透明質(zhì)酸在低波長(zhǎng)處的檢測(cè)干擾小，另外，所述三氟乙酸易揮發(fā)，可方便地從樣品中除去。

另外所述三氟乙酸具有強(qiáng)酸性，可用于調(diào)節(jié)所述流動(dòng)相pH，本發(fā)明中，當(dāng)所述流動(dòng)相pH＝4.00時(shí)，透明質(zhì)酸的穩(wěn)定性最好。

所述流動(dòng)相的流速為0.5-1.5ml/min，本發(fā)明的所述流動(dòng)相的流速設(shè)置為1.0ml/min時(shí)，透明質(zhì)酸的峰形良好，且保留時(shí)間短，進(jìn)一步地減少了檢測(cè)時(shí)間，提高了檢測(cè)效率。

本發(fā)明的透明質(zhì)酸的保留時(shí)間為10-16min，本發(fā)明縮短了原有的所述透明質(zhì)酸的保留時(shí)間，在對(duì)面膜中的透明質(zhì)酸含量進(jìn)行大批量檢測(cè)時(shí)，可以縮短總的檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)，不僅提高了檢測(cè)效率，而且大大降低了檢測(cè)成本。

所述色譜柱為NH₂色譜柱，所述色譜柱的柱溫為30-50℃。

所述試樣溶液中透明質(zhì)酸的含量不小于0.1％。