[發(fā)明專利]一種臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液及其用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910451040.0
• 申請日: 2019-05-28
• 公開（公告）號: CN110199984A
• 公開（公告）日: 2019-09-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 汪文
• 申請（專利權(quán)）人: 汪文
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 常州佰業(yè)騰飛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32231
• 代理人: 王巍巍

本發(fā)明公開了一種臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液及其用途，凍存液包括人血清白蛋白溶液、二甲基亞砜溶液、營養(yǎng)因子和藥學(xué)上可接受的載體，所述營養(yǎng)因子為血管內(nèi)皮細胞生長因子VEGF、轉(zhuǎn)化生長因子TGF、白介素6IL?6、纖維芽細胞生長因子bFGF、肝細胞生長因子HGF中的一種或多種，所述臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液在臍帶間充質(zhì)干細胞凍存中的應(yīng)用。通過上述方式，本發(fā)明采用一類特定的凍存液，可以凍存臍帶間充質(zhì)干細胞并使凍存后的臍帶間充質(zhì)干細胞保持活性和分化干性，具有良好的凍存效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細胞凍存技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液及其用途。

背景技術(shù)

細胞凍存是將細胞放在低溫環(huán)境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。

細胞凍存是利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃的液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于臨床應(yīng)用。適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時加入凍存液，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。采用“慢凍快融”的方法能較好地保證細胞存活。

目前傳統(tǒng)的細胞凍存液含有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、二甲基亞砜、胎牛血清等，但胎牛血清成分復(fù)雜，含有大量的異體抗原，在后續(xù)的復(fù)蘇培養(yǎng)環(huán)節(jié)很難清洗干凈，回輸?shù)饺梭w造成抗原抗體副反應(yīng)，因此目前傾向于采用無血清的替代物凍存細胞。但是，對于間充質(zhì)干細胞而言，即使采用無血清替代物的凍存液凍存后也會造成間充質(zhì)干細胞的“低溫眩暈效應(yīng)(Cryo-stun effect)”，導(dǎo)致間充質(zhì)干細胞失能效應(yīng)，失去間充質(zhì)干細胞的“干性(stemness)”，使間充質(zhì)干細胞的臨床應(yīng)用受到極大的限制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題是提供一種臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液及其用途，所述臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液施用方便、組分優(yōu)化，能夠保持凍存后臍帶間充質(zhì)干細胞“干性stemness”。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的一個技術(shù)方案是：提供一種臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液，包括人血清白蛋白溶液、二甲基亞砜溶液、營養(yǎng)因子和藥學(xué)上可接受的載體，所述營養(yǎng)因子為血管內(nèi)皮細胞生長因子VEGF、轉(zhuǎn)化生長因子TGF、白介素6IL-6、纖維芽細胞生長因子bFGF、肝細胞生長因子HGF中的一種或多種。

在本發(fā)明一個較佳實施例中，所述人血清白蛋白溶液為質(zhì)量分數(shù)為5-15％的人血清白蛋白溶液；所述二甲基亞砜溶液為質(zhì)量分數(shù)為5-10％的二甲基亞砜溶液；所述血管內(nèi)皮細胞生長因子的濃度為2-3ng/mL，所述纖維芽細胞生長因子的濃度為2-6ng/mL，所述白介素6的濃度為2-3ng/mL，所述肝細胞生長因子的濃度為15-20ng/mL，所述轉(zhuǎn)化生長因子的濃度為10-15ng/mL；所述人血清白蛋白溶液和所述二甲基亞砜溶液的質(zhì)量比為1-2:1；所述藥學(xué)上可接受的載體為復(fù)方電解質(zhì)注射液；所述臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液為單元劑型，所述單元劑型的體積為≤4mL。

在本發(fā)明一個較佳實施例中，所述人血清白蛋白溶液為質(zhì)量分數(shù)為8-12％的人血清白蛋白溶液；所述二甲基亞砜溶液為質(zhì)量分數(shù)為7-9％的二甲基亞砜溶液；所述人血清白蛋白溶液和所述二甲基亞砜溶液的質(zhì)量比為1-1.5:1；所述單元劑型的體積為≤2mL。

提供一種臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液的用途，所述臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液在臍帶間充質(zhì)干細胞凍存中的應(yīng)用。

在本發(fā)明一個較佳實施例中，每10⁵-10⁸/mL所述臍帶間充質(zhì)干細胞施用每個單元的所述臍帶間充質(zhì)干細胞凍存液。