[發明專利]基于表面拉曼增強鑒別真假藏紅花的方法

在審

• 申請號: 201910449600.9
• 申請日: 2019-05-28
• 公開（公告）號: CN110308134A
• 公開（公告）日: 2019-10-08
• 發明（設計）人: 聶鵬程;藺磊;董濤;瞿芳芳;蔡鋮勇
• 申請（專利權）人: 浙江大學山東工業技術研究院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 杭州天昊專利代理事務所(特殊普通合伙) 33283
• 代理人: 黃芳

本發明公開了基于表面拉曼增強鑒別真假藏紅花的方法，包括：步驟1、稱取300個進口藏紅花樣本，300個國產特級藏紅花樣本，100個摻假藏紅花樣本，進行拉曼光譜采集；步驟2、對藏紅花苷?I進行譜峰歸屬；步驟3、繪制三種藏紅花樣品平均光譜，根據光譜鑒定真假藏紅花。本發明首次將表面拉曼增強技術應用于真假藏紅花的鑒別，準確性高，時間短，操作簡單。

技術領域

本發明涉及植物檢測領域，更具體的說，它涉及基于表面拉曼增強鑒別真假藏紅花的方法。

背景技術

下面的背景技術用于幫助讀者理解本發明，而不能被認為是現有技術。

藏紅花，又名番紅花、藏紅花，藏紅花素為藏紅花的主要活性成分。藏紅花用途廣泛，在西班牙、法國等歐洲國家是必不可少的食品香料，在我國藏紅花是極為珍貴的藥材。藏紅花可用作抗氧化劑，抗癌素，抗抑郁藥，抗焦慮和壯陽藥等。藏紅花的主要有效成分是藏紅花苷-Ⅰ和藏紅花苷-Ⅱ，2015年中國藥典和香港中藥材標準第5冊均以藏紅花苷-Ⅰ和藏紅花苷-Ⅱ為指標成分對西紅花藥材進行質量評價和控制。由于紅花和藏紅花之間的形態相似性，以及紅花的低成本，市場上經常發生藏紅花與紅花的摻假，如果服用這些假冒或摻假的藏紅花有可能引起腹痛、腹瀉等癥狀，所以一種可靠快速地檢測西紅花苷-Ⅰ和西紅花苷-Ⅱ地含量對食品和藥用市場具有重要意義。

傳統的藏紅花檢測方法主要有高效液相色譜法(HPLC)，薄層色譜(TLC)，氣相色譜(GC)，毛細管電泳法(CE)等，雖然這些方法的靈敏度很高，但繁瑣的預實驗，分析時間長，以及消耗昂貴的試劑等缺點限制了它們的應用。所以這些方法不適用于藏紅花質量的快速檢測。

拉曼光譜技術(Raman Spectroscopy)是利用拉曼散射效應，樣品中化學鍵中幾種獨特的振動模式，甄別基團種類，從而實現對樣品的定性定量分析。由于拉曼光譜具有檢測速度快、簡單、可重復、樣品無損傷等優點，作為一種在線檢測分析技術在農產品檢測、食品安全等領域受到了普遍關注和應用研究。Zapata等人利用便攜式拉曼系統對七種含氧陰離子的混合物進行選擇性檢測，結果顯示拉曼檢測方法對于混合物中大多數含氧陰離子的單次測量檢測非常有用，無需先前的分離步驟。Farley等人使用拉曼光譜儀對摻入葡萄籽油和菜籽油的橄欖油進行檢測，結果顯示在1254，1657和1441cm^-1波段處，拉曼強度與摻假的程度有明顯的相關性。Oroian使用拉曼光譜用于檢測摻有果糖，葡萄糖，倒糖，水解菊粉糖漿和麥芽糖的蜂蜜，并使用偏最小二乘線性判別分析(PLS-LDA)對蜂蜜真實性進行了分類，并且觀察到總準確度為96.54％。

然而目前還沒有使用拉曼技術進行真假藏紅花檢測的研究。

發明內容

本發明的目的在于提供基于表面拉曼增強鑒別真假藏紅花的方法，實現藏紅花素的快速測定。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：基于表面拉曼增強鑒別真假藏紅花的方法，包括：

步驟1、稱取300個進口藏紅花樣本，300個國產特級藏紅花樣本，100個摻假藏紅花樣本，進行拉曼光譜采集；

步驟2、對藏紅花苷-I進行譜峰歸屬；

步驟3、繪制三種藏紅花樣品平均光譜，根據光譜鑒定真假藏紅花。

優選的，步驟(1)中，拉曼光譜采集的參數設置為：將乙腈用于儀器校準，激發波長為785nm，功率、掃描范圍、光學分辨率和積分時間分別設定200mW、200-3300cm^-1、2cm^-1和10s，收集平均光譜值三次。

優選的，步驟(2)中，獲得拉曼光譜的操作：(2.1)選取藏紅花苷-I的標準品；(2.2)將少許標準品置于載玻片壓平；(2.3)使用顯微鏡調整視野，確定被測物在激光掃描點上，拉曼探頭焦距控制6mm；(2.4)進行拉曼光譜采集。