[發(fā)明專利]一種測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量的試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910447121.3
• 申請(qǐng)日: 2019-05-27
• 公開（公告）號(hào): CN110095615A
• 公開（公告）日: 2019-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬萬(wàn)山;孟凡雪;譚柏清;王醒;趙志敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東艾科達(dá)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 濟(jì)南誠(chéng)智商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 37105
• 代理人: 韓百翠

本發(fā)明公開了一種測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量的試劑盒，該試劑盒包括R1試劑和R2試劑，R2試劑添加海帶巖藻聚糖，該成分對(duì)試劑中的牛血清白蛋白及抗體均有穩(wěn)定作用，從而更有效的保護(hù)了抗體，優(yōu)化了試劑性能。本試劑盒采用膠乳增強(qiáng)免疫散射比濁法測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定性好、靈敏度佳，擴(kuò)大了超敏C反應(yīng)蛋白測(cè)定的線性范圍。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量的試劑盒，屬于生物檢驗(yàn)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)是在機(jī)體受到感染或組織損傷時(shí)血漿中一些急劇上升的蛋白質(zhì)(急性蛋白)，激活補(bǔ)體和加強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬而起調(diào)理作用，清除入侵機(jī)體的病原微生物和損傷，壞死，凋亡的組織細(xì)胞。

CRP是急性時(shí)相反應(yīng)的一個(gè)極靈敏的指標(biāo)。在急性心肌梗死、腫癌浸潤(rùn)、創(chuàng)傷、外科手術(shù)、感染、炎癥時(shí)血漿中CRP濃度迅速增高，可達(dá)正常水平的2000倍。結(jié)合臨床病史，特別在炎癥過(guò)程中有助于隨訪病程。

目前國(guó)內(nèi)免疫比濁法試劑CRP出現(xiàn)了兩種(普通CRP與超敏CRP)，普通CRP有較高的線性但靈敏度不好，超敏CRP有較高的靈敏度但線性較低，這樣就出現(xiàn)了一種試劑兩種名稱，用途也有所區(qū)別；超敏CRP(Hs-CRP)輕度升高與冠狀動(dòng)脈事件、中風(fēng)及周圍血管病相關(guān)，是一項(xiàng)獨(dú)立的危險(xiǎn)因素；HS-CRP已被證實(shí)是由慢性炎癥引發(fā)心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，檢測(cè)其濃度對(duì)心血管疾病的干預(yù)及預(yù)后起重要作用而被臨床重視。

市場(chǎng)上的CRP檢測(cè)試劑盒存在著準(zhǔn)確度低、線性范圍窄、穩(wěn)定性差的缺點(diǎn)。本發(fā)明提供的試劑盒采用膠乳免疫散射比濁法，在乳膠抗體R2試劑中添加海帶巖藻聚糖作為穩(wěn)定劑，使得該試劑盒中抗體更加穩(wěn)定，從而提高了試劑盒的準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性，拓寬了試劑盒的線性范圍。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明克服了上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量的試劑盒。本發(fā)明添加海帶巖藻聚糖，采用膠乳增強(qiáng)免疫散射比濁法測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定性好、靈敏度佳，擴(kuò)大了超敏C反應(yīng)蛋白測(cè)定的線性范圍。

一種測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量的試劑盒，包括緩沖液R1試劑和乳膠抗體R2試劑；

所述乳膠抗體R2試劑中添加15mg/mL(該成分在試劑中的終濃度)的海帶巖藻聚糖。

進(jìn)一步的，上述的緩沖液R1試劑包括如下組分(下述各組分濃度均為該組分在試劑中的終濃度)：0.04-0.06mol/L 3-雙(2-羥乙基)氨基-2-羥基丙磺酸(DIPSO)緩沖液，0.10-0.15mol/L氯化鈉，0.1-0.2％曲拉通X-100，0.8-1.0％聚乙二醇6000，0.01-0.02％ProClin300。

進(jìn)一步的，上述膠乳抗體R2試劑還包括如下組分(下述各組分濃度均為該組分在試劑中的終濃度)：0.4-0.6mol/L磷酸鹽緩沖液，0.4-0.6mol/L MES緩沖液，0.25-0.26％抗人C反應(yīng)蛋白多克隆抗體膠乳，0.08-1％牛血清白蛋白，0.01-0.02％ProClin300。

進(jìn)一步的，上述3-雙(2-羥乙基)氨基-2-羥基丙磺酸(DIPSO)緩沖液pH為7.2-7.8，所述磷酸鹽緩沖液pH為6.8-7.6，所述MES緩沖液pH為5.6-6.4。

進(jìn)一步的，上述試劑盒在測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量中的應(yīng)用。

有益效果：

本發(fā)明提供一種測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白含量的試劑盒，該試劑盒添加了海帶巖藻聚糖，海帶巖藻聚糖可作為穩(wěn)定劑來(lái)穩(wěn)定試劑中的抗體及牛血清白蛋白。海帶巖藻聚糖是一種富含硫酸根的酸性聚陰離子多糖，其主鏈為巖藻糖，硫酸基主要位于巖藻糖的C2和/或C4位，以及側(cè)鏈半乳糖的C3和/或C4位。可見(jiàn)，海帶巖藻聚糖主鏈和側(cè)鏈均含有帶有負(fù)電荷的硫酸基團(tuán)。因此，海帶巖藻聚糖通過(guò)靜電排斥作用來(lái)穩(wěn)定R2試劑中的抗CRP抗體及牛血清白蛋白。