[發明專利]藏獒分子標記的特異性引物及檢測方法

有效

• 申請號: 201910422415.0
• 申請日: 2019-05-21
• 公開（公告）號: CN109988851B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 李艷
• 申請（專利權）人: 云南中科藏獒種質資源技術開發有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 昆明盛鼎宏圖知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53203
• 代理人: 王輝

本發明涉及涉及家犬品種藏獒單核苷酸變異及微衛星標記的特異性引物及檢測方法技術領域。本發明方法包括以下步驟，1)提取藏獒基因組DNA和其它家犬基因組DNA；2)以步驟(1)提取的基因組DNA為模板，使用SNP分子標記引物或引物組分別進行PCR擴增；3)、利用測序儀對PCR擴增產物進行測序；4)檢測單核苷酸多態位點的變異情況。本發明提供的一種藏獒分子標記用的特異性引物并交代了詳細的檢測方法，對藏獒犬的遺傳特征、譜系地理格局、群體結構的分析，以及種質資源的科學保護與利用均具有重要的應用價值。

技術領域

本發明屬于分子標記技術領域，具體涉及家犬品種藏獒單核苷酸變異及微衛星標記的特異性引物及檢測方法技術領域。

背景技術

藏獒(Tibetan Mastiff)隸屬于食肉目犬科犬屬灰狼種的家犬亞種(Canis lupusfamiliaris)，是青藏高原特有的家犬品種，主要分布于青藏高原及喜馬拉雅山脈，包括尼泊爾、印度、不丹。歷史上，藏獒主要被當地牧民飼養，用于保護畜牧牲口免于野外捕食動物的侵害。近年來，由于其獨特適應高原的表型和能力備受市場追捧，過度貿易、錯誤引種、隨意繁殖、人為炒作等市場行為使藏獒種質資源面臨巨大威脅。為了科學保護藏獒種質資源，實現資源的可持續發展與利用，開展該種的特異遺傳變異標記及群體遺傳特征分析以及分子標記育種具有重要意義。目前，尚未見藏獒遺傳分子標記開發的相關報道。

發明內容

本發明正是為了解決上述問題缺陷，提供一種藏獒分子標記用的特異性引物并交代了詳細的檢測方法，對藏獒犬的遺傳特征、譜系地理格局、群體結構的分析，以及種質資源的科學保護與利用均具有重要的應用價值。

本發明采用如下技術方案實現。

一種SNP分子標記引物，本發明該分子標記引物擇一包含以下引物對；

TM-P1：F:TGCAAGGAGGAGGAAGAAGG，

R:CTCCCAGTCTCTTGCCTCTG；

TM-P2：F:TGCAAGGAGGAGGAAGAAGG，

R:CTCCCAGTCTCTTGCCTCTG；

TM-E：F:CATTCAGTCAGCATTTCTGC

R:GGGCTGCAGGTTGCGAGGGT；

TM-M：F:TTCTTACATGGCAGCTGGTG，

R:CTTTTCCCTGTGAGCTCTGG；

TM-M1：F:GCTGCAATCCACAATGAAGA，

R:ATGCAGTCAGAACCCCAAGT；

TM-H1：F:GAGGCTTCAAATGCCTTGAG，

R:CATGCCTTAGGGGCAGTAAA；

TM-H2：F:GAGGCTTCAAATGCCTTGAG，

R:CATGCCTTAGGGGCAGTAAA；

TM-C：F:AGTCCCCAGAAGGTTCCATG，

R:GCAACCGGTGGAAAGTTTCT；

TM-S：F:GGCCTCCATGCTTAGCTCTA，

R:AGCACCTTACAGACTCCACC；其中F為上游引物，R為下游引物。