[發明專利]一種雙抑制電致化學發光傳感器及測定草甘膦的方法

有效

• 申請號: 201910402589.0
• 申請日: 2019-05-15
• 公開（公告）號: CN110186910B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 周長利;劉漢彪;陳培培;劉建輝;衣姜樂;夏方詮
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N27/30;G01N27/48
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 李茜

本發明涉及農殘分析測定技術領域，特別是涉及一種雙抑制電致化學發光傳感器以及用其測定草甘膦的方法，包括雙抑制傳感器制備步驟和使用該傳感器測定草甘膦的操作方法等；這種雙抑制傳感器，利用了酶促反應和銅絡合物類過氧化酶催化作用，是兩種信號轉換方式的結合而產生協同效應，有效提高傳感器的檢測靈敏度；用于草甘膦的檢測，共存物質的干擾小，選擇性好，靈敏度高。

技術領域

本發明涉及農殘分析測定技術領域，特別是涉及一種雙抑制電致化學發光傳感器以及用其測定草甘膦的方法，包括雙抑制傳感器制備步驟和使用該傳感器測定草甘膦的操作方法等；這種雙抑制傳感器，利用了酶促反應和銅絡合物類過氧化酶催化作用，是兩種信號轉換方式的結合而產生協同效應；通過草甘膦抑制酶促反應，同時抑制類過氧化物酶的催化作用，高靈敏測定草甘膦，共存物質的干擾小，選擇性好。

背景技術

發展農藥殘留檢測技術，尤其是快速檢測技術，及時監控環境和食品中的農藥殘留，對于保護環境，保障人們身體健康和生命安全都具有重要意義。草甘膦是一種非選擇性、滅生性除草劑，作為一種廣泛使用的農藥，已引起人們對于其殘留潛在危害的高度關注。目前化學分析法是常規的分析方法，主要依靠草甘膦的化學性質與其他物質發生化學反應，準確度與靈敏度相對較低，不太適合草甘膦殘留及痕量分析；化學發光法雖然靈敏度還不錯，但是大多用于草甘膦原藥的檢測分析，對于食品和水質草甘膦殘留分析靈敏度不是特別高；分光光度法操作簡便、分析快速, 但易受其他離子的干擾；尤其是與最大吸收波長相近的物質，所以在草甘膦殘留量檢測分析中研究中并不多；酶聯免疫吸附法具有準確性、特異性、穩定性和適用范圍廣、檢測速度快以及費用低的特點, 但是易發生交叉反應影響檢測靈敏度；草甘膦檢測技術除以上介紹的幾大類方法外, 還有紅外光譜法、核磁共振法、分子印跡-化學發光法和色譜等聯用技術等。酶生物傳感器是目前農藥殘留快速檢測技術中的研究熱點之一，但是，目前對于草甘膦檢測的生物傳感器報道的不多，亟需開發研究新型生物傳感器，包括酶生物傳感器、免疫傳感器和DNA傳感器，以適應當前的迫切需求。

酶生物傳感器可分為單酶、雙酶等類型。用于農藥檢測的酶主要有乙酰膽堿酯酶、膽堿氧化酶、有機磷水解酶等。雙酶生物傳感器是將乙酰膽堿酯酶(AChE)與膽堿氧化酶(ChOX)耦合。AChE水解其天然底物生成膽堿和乙酸，由于膽堿沒有電化學活性，使用ChOX將膽堿氧化，消耗氧而生成H₂O₂，可用電流型酶電極測定溶液中消耗的O₂或生成的H₂O₂來檢測有機磷和氨基甲酸酯類農藥的含量。與本發明相近的是Shihua Hou等人報道的方法：將金納米粒子吸附在含有多壁碳納米管和ChOX的硫醇化硅溶膠上，再將AChE由二烯丙基二甲基氯化銨（PDDA）層層組裝到修飾電極上，得到雙酶傳感器。利用安培法在+0.65Ｖ檢測H₂O₂，但是由于此工作電位比較高，雙酶體系安培法容易受到其它共存電活性物質的干擾。

發明內容

本發明的目的就是針對草甘膦分析檢測研究中的不足，構建一種能夠用于高靈敏檢測農藥殘留草甘膦的雙抑制電致化學發光傳感器。本發明要解決的技術問題是基于酶促反應和Cu²⁺具有的類過氧化酶催化作用，發揮兩種信號轉換方式的協同效應，構建雙抑制電致化學發光傳感器，用于草甘膦的檢測，有效提高傳感器的檢測靈敏度和選擇性。

本發明的技術方案