[發明專利]貝萊斯芽孢桿菌118及其生物菌劑與應用

在審

• 申請號: 201910391310.3
• 申請日: 2019-05-12
• 公開（公告）號: CN110387337A
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發明（設計）人: 蔡燕飛;王玉琪;章家恩;劉曉玉;周晗;裴秦漢
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/07
• 代理公司: 廣州市科豐知識產權代理事務所(普通合伙) 44467
• 代理人: 王海曼

本發明公開了一種貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)118及其應用，該菌株保藏編號為GDMCC No.60625，于2019年04月04日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(GDMCC)；該菌株防控番茄青枯病和香蕉枯萎病、促進植株生長、高產生物膜和有效定殖根際等優點；該菌株共有5個胞外功能δ因子，包括δ^M,δ^W,δ^X,δ^V和ylaC。其中δ^X基因具有調控生物膜皺褶和花瓣形成、提高生物膜產量、加快蠕動和游動速度、和提高根際定殖率的功能；ylaC基因具有調控生物膜形態的功能；利用該菌株制備生物菌劑，既可以防治土傳病害又能促進植物生長，應用前景廣闊；屬于農業生物技術領域。

技術領域

本發明涉及植物土傳病害生物防治領域，是一種微生物及其應用，具體涉及一種貝萊斯芽孢桿菌118(Bacillus velezensis)及應用。

背景技術

作物土傳病害是農業生產中制約產量及品質的主要問題之一，如枯萎病、青枯病、疫病、根腐病和紋枯病等在華南地區普遍發生，輕則減產，重則造成作物絕收。香蕉枯萎病是由尖孢鐮刀菌古巴專化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)引起的真菌性土傳病害，番茄青枯病是由青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的細菌性土傳病害。作物土傳病害主要通過改進栽培措施、物理消毒、化學農藥等方式來防治，但化學農藥的大量使用，不僅造成農作物農藥殘留，還造成環境污染，破壞生態環境。微生物農藥具有安全無害、雙減增效、不易產生抗藥性等優點，在國家綠色農業中日顯益重要。為此，挖掘新型高效生防微生物資源及其高效基因資源，對作物土傳病害的生物防治和促進植株生長均具有重要的意義。

貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)是新型的植物防病促生微生物，為了與工業發酵用的解淀粉芽孢桿菌DSM9等區分開，Fan等于2017正式啟用新名稱為貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)。貝萊斯芽孢桿菌共有有5個胞外功能(extracytoplasmicfunctional sigma factor， ECF)σ因子(δ^M、δ^X、δ^W、δ^V和ylaC)，胞外功能(ECF)σ因子是應答各種脅迫環境的轉錄調節因子(Luo et al.，2010；Onozawa et al.，2015)，具有調控細胞相關功能基因表達的功能，從而提高菌株在環境中的競爭、拮抗、運動和定殖等各種生存能力。為此，探究ECFσ因子在細菌生物膜形成、游動和蠕動、根系定殖等方面的調控作用，對提高生防菌劑的田間定殖和生防潛力具有重要的實際意義。

通過游動和蠕動，產生生物膜而粘附植株根系而定殖，是生防菌劑田間防效和肥效發揮的前提，為了探究σ因子在根際定殖中的作用，采用長臂同源多聚酶鏈式反應(longflanking homology polymerase chain reaction，LFH-PCR)技術分別構建了5個σ因子(δ^M、δ^X、δ^W、δ^V、 ylaC)的基因缺失株。比較野生株和突變株之間的生物膜形態和產量、游動和蠕動、粘附根系等差異，篩選相應的高效基因，可望解決當前生防菌劑田間效果不穩定性的技術瓶頸。

發明內容

本發明的第一目的在于根據現有技術中上述問題，提供一種新型的兼具防病促生、高產生物膜和高效根系定殖功能的貝萊斯芽孢桿菌118(Bacillus velezensis)。

本發明的第二個目的在于提供上述貝萊斯芽孢桿菌118制備的生物菌劑。

本發明的第三個目的是在于提供貝萊斯芽孢桿菌118及其生物菌劑的應用。

為此，本發明的第一個目的通過以下技術方案實現：