[發明專利]一種利用微通道模塊化反應裝置合成亮丙瑞林的方法

有效

• 申請號: 201910383467.1
• 申請日: 2019-05-09
• 公開（公告）號: CN110078798B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發明（設計）人: 蘇賢斌;楊洋;卞亞楠;崔營營
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C07K7/23
• 分類號: C07K7/23;C07K1/16;C07K1/08;C07K1/02
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 胡建華

1.一種利用微通道模塊化反應裝置合成亮丙瑞林的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將活化后的Z-Pro-OH、縮合試劑和有機溶劑三者形成的混合液，與乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，分別同時泵入微通道模塊化反應裝置中的第一微結構反應器中進行氨基酸之間的縮合反應，30~70°C下停留時間1~15min；將第一微結構反應器流出液，與碳酸鈉水溶液分別同時泵入到微通道模塊化反應裝置中的第二微結構反應器中進行洗滌，30~70°C下停留時間8~12min，洗滌后的流出液在靜置分液裝置中靜置分層，保留有機層；將有機層泵入柱加氫設備進行脫Z保護的反應，30~50°C下，氫氣壓力0.3Mpa~0.6Mpa，保留柱加氫設備中流出的反應液I；

（2）將活化后的Z-Arg(Pg)-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（1）得到的反應液I替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到反應液II；

（3）將活化后的Z-Leu-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（2）得到的反應液II替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到反應液III；

（4）將活化后的Z-D-Leu-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（3）得到的反應液III替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到反應液IV；

（5）將活化后的Z-Tyr(tBu)-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（4）得到的反應液IV替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到反應液V；

（6）將活化后的Z-Ser(tBu)-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（5）得到的反應液V替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到反應液VI；

（7）將活化后的Z-Trp(Boc)-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（6）得到的反應液VI替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到反應液VII；

（8）將活化后的Z-His(Trt)-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（7）得到的反應液VII替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到反應液VIII；

（9）將活化后的Z-Pyr-OH替換步驟（1）中的Z-Pro-OH，將步驟（8）得到的反應液VIII替換步驟（1）中所述的乙胺水溶液和有機溶劑二者形成的混合液，進行步驟（1）相同的反應和處理過程，得到H-Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Leu-Leu-Arg(Pg)-Pro-NHEt；

（10）將步驟（9）得到的帶側鏈保護的亮丙瑞林H-Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Leu-Leu-Arg(Pg)-Pro-NHEt進行裂解得到粗肽，并將粗肽經液相色譜進行制備純化，得到亮丙瑞林；

所述的活化后的Z-Pro-OH、活化后的Z-Arg(Pg)-OH、活化后的Z-Leu-OH、活化后的Z-D-Leu-OH、活化后的Z-Tyr(tBu)-OH、活化后的Z-Ser(tBu)-OH、活化后的Z-Trp(Boc)-OH、活化后的Z-His(Trt)-OH、活化后Z-Pyr-OH，是將Z-Pro-OH、Z-Arg(Boc)₂-OH、Z-Leu-OH、Z-D-Leu-OH、Z-Tyr(tBu)-OH、Z-Ser(tBu)-OH、Z-Trp(Boc)-OH、Z-His(Trt)-OH、Z-Pyr-OH分別在有機溶劑中活化30min得到；上述步驟中采用的有機溶劑相同，均選自乙酸乙酯、二氯甲烷、四氫呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷中的任意一種；所述的縮合試劑為HOBt、DMAP、EDC·HCl、DIC、DCC、PyBop、CDI或HATU中的任意一種或幾種的組合；所述的碳酸鈉水溶液，其碳酸鈉濃度為10wt%；

具體地，步驟（1）中，Z-Pro-OH、縮合試劑的摩爾比為1：1.2；Z-Pro-OH與乙胺的摩爾比控制為1.2：1；

步驟（2）中，Arg的胍基保護基Pg是Pbf、Mbs、(Boc)₂以及Mtr中的任意一種；裂解條件依據Pg的選擇而決定，Pg為Pbf以及Mbs保護基時，裂解條件是TFA/TIS/H₂O=96%：2%：2%（v/v/v）；Pg為(Boc)₂以及Mtr保護基時，裂解條件是TFA/苯甲醚/苯甲硫醚/H₂O=91%：3%：3%：3%（v/v/v/v）；裂解結束后，加入乙醚沉降出亮丙瑞林粗肽，乙醚與裂解液的體積比為6比1。