[發(fā)明專利]一種轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米事件的創(chuàng)制方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910382625.1 | 申請日： | 2019-04-26 |
| 公開（公告）號： | CN110184276A | 公開（公告）日： | 2019-08-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 余桂容;杜文平;宋軍;徐利遠(yuǎn);陳謙;鄧自圓;張敏;林楊 | 申請（專利權(quán)）人： | 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)核技術(shù)研究所 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 610061*** | 國省代碼： | 四川;51 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 互補序列 抗除草劑 轉(zhuǎn)基因 玉米 耐受性 草甘膦除草劑 轉(zhuǎn)基因玉米 核酸序列 | ||
1.一種核酸序列，其特征在于，包括SEQ ID NO：1或其互補序列、和/或SEQ ID NO：2或其互補序列，所述核酸序列源自轉(zhuǎn)基因玉米事件T抗-4。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸序列，其特征在于，所述核酸序列包括SEQ ID NO：3或其互補序列、和/或SEQ ID NO：4或其互補序列。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的核酸序列，其特征在于，所述核酸序列包括SEQ ID NO：5或其互補序列。
4.一種轉(zhuǎn)基因玉米抗除草劑玉米事件的制備方法，其步驟如下：
a)構(gòu)建含有SEQ ID NO：5第399-4244位核苷酸所示序列的轉(zhuǎn)化載體；
b)利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法將載體轉(zhuǎn)化入玉米幼胚中，經(jīng)恢復(fù)培養(yǎng)后選擇愈傷長成新的轉(zhuǎn)基因玉米植株；
c)目的基因分子檢測。根據(jù)基因序列設(shè)計PCR引物對，引物序列分別為SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：13，選取轉(zhuǎn)基因玉米葉片進(jìn)行目的基因擴增，并保留檢測結(jié)果陽性的植株；
d)轉(zhuǎn)基因玉米植株對除草劑耐受性篩選；
e)轉(zhuǎn)化體目的基因拷貝數(shù)檢測，保留單拷貝植株；
f)轉(zhuǎn)化體側(cè)翼分離及驗證。
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