[發明專利]一種腺嘌呤堿基編輯工具及其用途

有效

• 申請號: 201910382569.1
• 申請日: 2019-05-09
• 公開（公告）號: CN110029096B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 黃詩圣;李向陽;黃行許
• 申請（專利權）人: 上海科技大學
• 主分類號: C12N9/22
• 分類號: C12N9/22;C12N9/78;C12N15/55;C12N15/90
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 嚴晨;許亦琳

1.一種腺嘌呤堿基編輯器，包括ecTadA-ecTadA*二聚體片段和SpCas9-NG?D10Anickase片段，所述ecTadA-ecTadA*二聚體片段包括ecTad片段和ecTadA*片段，所述SpCas9-NG?D10A?nickase片段的氨基酸序列為如SEQ?ID?NO.?59所示的氨基酸序列；

所述腺嘌呤堿基編輯器自5’端至3’端依次包括ecTadA-ecTadA*二聚體片段和SpCas9-NG?D10A?nickase片段；

所述ecTadA-ecTadA*二聚體片段自5’端至3’端依次包括ecTad片段和ecTadA*片段；

所述腺嘌呤堿基編輯器還包括核定位信號片段，所述核定位信號片段的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.?60所示；

所述腺嘌呤堿基編輯器的氨基酸序列如SEQ?ID?No.?61所示。

2.如權利要求1所述的腺嘌呤堿基編輯器，其特征在于，所述ecTadA片段的氨基酸序列為

如SEQ?ID?NO.?57所示的氨基酸序列。

3.如權利要求1所述的腺嘌呤堿基編輯器，其特征在于，所述ecTadA*片段的氨基酸序列為如SEQ?ID?NO.?58所示的氨基酸序列。

4.一種分離的多核苷酸，編碼如權利要求1-3任一所述的腺嘌呤堿基編輯器。

5.一種構建體，所述構建體含有如權利要求4所述的分離的多核苷酸。

6.一種表達系統，所述表達系統含有如權利要求5所述的構建體或基因組中整合有外源的如權利要求4所述的多核苷酸。

7.如權利要求6所述的表達系統，其特征在于，所述表達系統的宿主細胞選自真核細胞或原核細胞。

8.如權利要求1-3任一所述的腺嘌呤堿基編輯器、如權利要求4所述的分離的多核苷酸、如權利要求5所述的構建體或如權利要求6-7任一權利要求所述的表達系統在基因編輯中的用途。

9.如權利要求8所述的用途，其特征在于，所述用途具體為在真核生物的基因編輯中的用途。

10.一種堿基編輯體系，包括如權利要求1-3任一所述的腺嘌呤堿基編輯器和sgRNA。

11.一種基因編輯方法，包括：通過如權利要求1-3任一所述的腺嘌呤堿基編輯器、或如權利要求10所述的堿基編輯體系進行基因編輯。