[發明專利]一種人臍帶間充質干細胞注射液及其面部填充注射方法

有效

• 申請號: 201910376734.2
• 申請日: 2019-05-07
• 公開（公告）號: CN110141686B
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 張永;唐新剛
• 申請（專利權）人: 吉林省海創生物科技有限公司
• 主分類號: A61L27/38
• 分類號: A61L27/38;A61L27/36;A61L27/10;A61L27/50
• 代理公司: 北京棧橋知識產權代理事務所(普通合伙) 11670
• 代理人: 劉亞娟

1.一種人臍帶間充質干細胞注射液，其特征在于，所述人臍帶間充質干細胞注射液按重量百分比計由：12～15％人臍帶間充質干細胞、5～8％生物活性玻璃納米粉體、10～12％人血白蛋白原液、3～6％玻尿酸、1～2％肝素鈣、5～8％復方電解質、0.5～1％海藻糖、1.5％～2.5％葡聚糖、1～1.5％甘氨酸、1～1.5％尿囊素、2～4％檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、0.8～1.2％煙酰胺、0.5～1％pH調節劑、0.4～0.7％抗氧化劑、0.2～0.5％抗菌劑，余量為活化水；

所述人臍帶間充質干細胞注射液的制備方法包括以下步驟：

S1：按上述劑量選取生物活性玻璃納米粉體、人血白蛋白原液、玻尿酸、肝素鈣、復方電解質、海藻糖、葡聚糖、甘氨酸、尿囊素、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、煙酰胺、pH調節劑、抗氧化劑、抗菌劑；

S2：將玻尿酸、肝素鈣、復方電解質、人血白蛋白原液混合得到混合液A，待用；將海藻糖、葡聚糖、甘氨酸、尿囊素、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液混合得到混合液B，待用；

S3：將人臍帶間充質干細胞經原代分離培養后，按3.2×10⁴cm²的密度接種到培養皿中培養，細胞培養到85～95％融合時，然后再加入體積比為6:3：0.2的質量分數為0.25％胰蛋白酶、質量分數為0.1％膠原酶、質量分數為0.05％1-三苯甲基甘露醇的混合酶液，消化25～40min，然后按照1：12分種比接種到新的培養皿中進行數次傳代培養，取傳代培養的P3-P8代人臍帶間充質干細胞，得到人臍帶間充質干細胞；

S4：將人臍帶間充質干細胞加入到混合液A中，待用；然后將混合液B升溫至35～39℃后，依次加入煙酰胺、生物活性玻璃納米粉體，攪拌均勻后加入占混合液B總體積30％的超順磁性顆粒，并施加雙極性脈沖電壓處理5～8分鐘，過濾回收超順磁性顆粒后，得到混合液C；其中，所述雙極性脈沖電壓為產生的頻率為5～130Hz，磁感應強度0.5T～3T的振蕩磁場；

S5：將pH調節劑、抗氧化劑、抗菌劑依次加入到混合液C中，并加入活化水定容至人臍帶間充質干細胞的濃度為7.2×10⁵-8.2×10⁵，得到人臍帶間充質干細胞注射液；

S6：在進行面部填充注射前需要對人臍帶間充質干細胞注射液使用預處理器進行預處理后才可使用注射器注射，

其中，所述預處理器包括球殼(1)、主桿(2)和隔板(6)，所述球殼(1)內部中空，球殼(1)的上頂面、下底面分別設有抽液口(8)、注液口(7)與其內部連通，所述主桿(2)豎向設置在球殼(1)內中心軸線處，且貫穿多個所述隔板(6)，所述隔板(6)等間距設置并與球殼(1)內壁固定連接，隔板(6)上均勻設有密集的通孔(61)，每相鄰的兩個隔板(6)之間的主桿(2)上各設有一個磁套(3)，所述磁套(3)配設有磁環(4)，所述磁環(4)的左右兩外側各設有一個磁葉(5)，所述磁葉(5)中部設有通槽(51)，所述通槽(51)內橫向設有螺旋葉(52)。

2.根據權利要求1所述的一種人臍帶間充質干細胞注射液，其特征在于，所述超順磁性顆粒具體為汝鐵硼磁鐵顆粒，且外層包被有厚度為0.2mm陶瓷薄膜，超順磁性顆粒的粒徑為2mm。

3.根據權利要求1所述的一種人臍帶間充質干細胞注射液，其特征在于，所述生物活性玻璃納米粉體的制備方法為：將十六烷基三甲基氯化銨、聚氧乙烯-聚苯乙烯-聚氧乙烯三嵌段聚合物、納米銀、叔丁基對苯二酚、去離子水按照摩爾比為(1～1.8)：(2～6)：(0.5～0.8)：(0.2～0.3)：800配成混合液，然后依次將四氯化硅、三乙基磷酸及檸檬酸鈣加入到所述混合液中，磁力攪拌均勻得到混合初液；再將所述混合初液離心、沉淀、清洗后得到沉淀物，再將沉淀物通過熱風去掉表面水后，再在真空度0.1～0.15Mpa，65～75℃下微波干燥20～25min，隨后陰干1～2天，得到粉狀物；再將粉狀物在720～890℃下熱處理2～3h后制粉，得到所述生物活性玻璃納米粉體；

其中，所述十六烷基三甲基氯化銨質量濃度為2.7mmol/L；所述四氯化硅、三乙基磷酸、檸檬酸鈣、混合液的摩爾比為(40～55)：(25～32)：(7～14)：1000。