[發明專利]與小麥穗抽出度QTL QPel.HN.6D緊密連鎖的分子標記及其應用

有效

• 申請號: 201910372953.3
• 申請日: 2019-05-06
• 公開（公告）號: CN110106274B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 劉亞西;易鑫;陶陽;林宇;王智強;石浩然;武方琨;李彩霞;魏育明;鄭有良
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

1.用于檢測與小麥穗抽出度相關的分子標記的特異性引物對在鑒定具有低穗抽出度的小麥品種中的應用；

所述分子標記的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其中n為G或T，堿基為G時對應于低穗抽出度。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述特異性引物對包括序列如SEQ IDNO.2所示的上游引物和序列如SEQ ID NO.3所示的下游引物。

3.用于檢測與小麥穗抽出度相關的分子標記的特異性引物對在具有低穗抽出度的小麥的分子標記輔助育種中的應用；

所述分子標記的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其中n為G或T，堿基為G時對應于低穗抽出度。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述特異性引物對包括序列如SEQ IDNO.2所示的上游引物和序列如SEQ ID NO.3所示的下游引物。

5.用于檢測與小麥穗抽出度相關的分子標記的特異性引物對在以獲得低穗抽出度的小麥為目的的種質資源改良中的應用；

所述分子標記的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其中n為G或T，堿基為G時對應于低穗抽出度。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述特異性引物對包括序列如SEQ IDNO.2所示的上游引物和序列如SEQ ID NO.3所示的下游引物。

7.一種鑒定與小麥穗抽出度相關的分子標記的方法，其特征在于，以待測小麥的基因組DNA為模板，采用特異性引物對進行熒光定量PCR擴增，根據PCR擴增結果對待測小麥進行基因分型；

所述分子標記的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其中n為G或T，堿基為G時對應于低穗抽出度；

所述特異性引物對包括序列如SEQ ID NO.2所示的上游引物和序列如SEQ ID NO.3所示的下游引物。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述熒光定量PCR擴增的反應程序包括：95℃預變性5min；94℃變性15s、55℃退火30s， 50個循環；熔解曲線范圍為65~95℃，每0.2℃讀一次數，時間為10s。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述熒光定量PCR擴增的10μL反應體系如下：SsoFast EvaGreen超混合液5μL、上游引物和下游引物各300ng、模板DNA 100ng、Dnase-free和RNase-free的去離子水加至總量為10μL。

10.根據權利要求7~9任一項所述的方法，其特征在于，所述根據PCR擴增結果對待測小麥進行基因分型采用高分辨率熔解曲線技術，熔解曲線與小麥H461相同的小麥品種中如SEQ ID NO.1所示的分子標記的核苷酸序列中的n為G；熔解曲線與小麥H461不同的小麥品種中如SEQ ID NO.1所示的分子標記的核苷酸序列中的n為T。