[發明專利]一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H2O2酶生物傳感器制備方法

在審

• 申請號: 201910372525.0
• 申請日: 2019-05-06
• 公開（公告）號: CN110146565A
• 公開（公告）日: 2019-08-20
• 發明（設計）人: 曾虹燕;曹曉菊;徐圣;曹熙;鄒開敏
• 申請（專利權）人: 湘潭大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

1.一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將尿素加入金屬鹽溶液中，然后逐滴滴加天然高分子化合物溶液，加熱攪拌反應，降溫靜態晶化后洗滌、干燥、粉碎，得到水滑石-天然高分子化合物復合納米材料；

2)將水滑石-天然高分子化合物復合納米材料投入HRP的磷酸緩沖液中，震蕩固化HRP，得到水滑石-天然高分子化合物/HRP復合電極材料；

3)預處理玻碳電極，備用，用水滑石-天然高分子化合物/HRP復合電極材料修飾已預處理的玻碳電極作為工作電極，以鉑電極為對電極，飽和甘汞電極為參比電極構建標準三電極體系，即得所述基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器。

2.根據權利要求1所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，步驟1)中所述金屬鹽溶液中金屬離子的濃度為0.01～0.60mol/L。

3.根據權利要求2所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，所述金屬離子為可溶性的二價金屬鹽M²⁺和可溶性的三價金屬鹽M³⁺以2.0～5.0：1的摩爾比混合的混合物。

4.根據權利要求3所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，所述二價金屬鹽M²⁺中的金屬離子M²⁺為Zn²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Ni²⁺和Mn²⁺金屬離子中的任一種；

所述三價金屬鹽M³⁺中的金屬離子為Al³⁺和Fe³⁺金屬離子中的任一種。

5.根據權利要求1所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，步驟1)中所述尿素的加入量為加入至尿素與金屬鹽溶液中的陰離子總摩爾比為1.0～6.0：1；

所述天然高分子化合物為殼聚糖、殼聚糖的衍生物和海藻酸鈉中的任一種；

所述天然高分子化合物的加入量為加入天然高分子化合物至濃度為0.05～6.0g/L。

6.根據權利要求1所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，步驟1)中所述加熱攪拌反應的操作為加熱至100～115℃攪拌反應10～18h；

所述降溫靜態晶化為降溫至65～85℃靜態晶化8～15h。

7.根據權利要求1所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，步驟2)中所述水滑石-天然高分子化合物復合納米材料與HRP的磷酸緩沖液中HRP的質量比為0.4～4.0：1。

8.根據權利要求7所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，所述HRP的磷酸緩沖液的濃度為0.1mol/L，pH值為7.0。

9.根據權利要求1所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，步驟2)中所述震蕩固化HRP的時間為4～8h。

10.根據權利要求1所述的一種基于水滑石-天然高分子化合物/HRP復合材料的H₂O₂酶生物傳感器制備方法，其特征在于，步驟3)中所述預處理玻碳電極的方法為用砂紙和Al₂O₃拋光粉打磨玻碳電極后，依次用蒸餾水、無水乙醇和蒸餾水超聲洗滌，晾干。