[發(fā)明專利]一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910367194.1
• 申請(qǐng)日: 2019-05-05
• 公開（公告）號(hào): CN110066841B
• 公開（公告）日: 2020-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 錢衛(wèi)東;張家寧;沈蘭芳;劉淼;孫照歡;楊敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P19/14
• 分類號(hào): C12P19/14;C12P19/02
• 代理公司: 西安眾和至成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61249
• 代理人: 強(qiáng)宏超

1.一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，包括如下步驟：

Q1：將赤芍中藥材洗凈并冷凍干燥后，進(jìn)行超聲波破壁處理，得到破壁的待提取赤芍中藥材粉；

Q2：按照比例每千克赤芍中藥材粉，分別取0.02～0.05g果膠酶、0.02～0.05g纖維素酶和0.02～0.05g淀粉酶；再取酶激活劑聚醚并與赤芍中藥材粉混合并在反應(yīng)罐內(nèi)酶解，酶解溫度在35～55℃范圍梯度變化，得到赤芍酶解液；果膠酶、纖維素酶與淀粉酶的混合酶與酶激活劑聚醚的質(zhì)量比為0.3～0.5％；

Q3：取1×10⁸～10¹⁰cfu/ml的酵母菌發(fā)酵液和1×10⁸～10¹⁰cfu/ml的短刺小克銀漢霉菌發(fā)酵液，并與赤芍酶解液混合，然后在酶解罐內(nèi)發(fā)酵，發(fā)酵溫度為28～35℃，得到赤芍發(fā)酵液；酵母菌發(fā)酵液發(fā)酵液、短刺小克銀漢霉菌發(fā)酵液和赤芍酶解液的體積比為1:1:50；

Q4：向赤芍發(fā)酵液中加入純化水，充分?jǐn)嚢杼崛。蛛x提取液和濾渣；

Q5：提取液依次使用大孔樹脂吸附法進(jìn)行吸附、用體積濃度為40％的乙醇和純化水洗滌、以體積濃度為95％的乙醇溶液洗脫，之后收集赤芍洗脫液；調(diào)節(jié)洗脫液pH值為2～4，于40～60℃下濃縮回收處理60～90min使洗脫液濃縮，然后冷凍干燥，得芍藥內(nèi)酯苷提取物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，所述步驟Q1中赤芍中藥材切成3～5mm片狀后，置于-10～-50℃條件下冷凍干燥2～5h；然后在-5～-15℃下進(jìn)行超聲波破壁處理，超聲波破壁的超聲波功率為800～1000w，時(shí)間為40～50min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，所述步驟Q2具體包括如下步驟：

Q21：稱取果膠酶、纖維素酶、淀粉酶與酶激活劑聚醚，并與赤芍中藥材粉混合均勻，得酶藥混合物；

Q22：酶藥混合物均勻的鋪設(shè)在反應(yīng)罐內(nèi)，關(guān)閉反應(yīng)罐；

Q23：控制反應(yīng)罐內(nèi)的溫度，在反應(yīng)罐內(nèi)酶解2～3h，然后恢復(fù)反應(yīng)罐內(nèi)壓力至常壓狀態(tài)，得到赤芍酶解液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，所述步驟Q23中依次35℃酶解0.5h，45℃酶解1h，55℃酶解1h。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，所述步驟Q23中反應(yīng)罐內(nèi)的壓力為0.4～0.6Mpa，pH為4～5。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，所述步驟Q3具體包括如下步驟：

Q31：取酵母菌、短刺小克銀漢酶發(fā)酵液和赤芍酶解液，按照1:1:50體積比進(jìn)行混合均勻，得混合物置于酶解罐內(nèi)；

Q32：控制酶解罐內(nèi)的溫度發(fā)酵2～3h后，恢復(fù)酶解罐內(nèi)壓力至常壓狀態(tài)，得到并取出赤芍發(fā)酵液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，所述步驟Q32中酶解罐內(nèi)的pH為5～8。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高赤芍有效成分芍藥內(nèi)酯苷提取得率的方法，其特征在于，所述步驟Q4重復(fù)2～3次，步驟Q4中純化水的溫度為50～70℃，每次加入的純化水與赤芍發(fā)酵液的體積比為6～10:1。