[發明專利]hTERT-miR-221/222海綿及其在逆轉乳腺癌的他莫昔芬耐藥中的應用

有效

• 申請號: 201910364686.5
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN110172460B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 張國君;陳敏;歐陽檐秀;馮軍
• 申請（專利權）人: 廈門大學附屬翔安醫院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

hTERT?miR?221/222海綿及其在逆轉乳腺癌的他莫昔芬耐藥中的應用，涉及乳腺癌內分泌耐藥的治療。所述hTERT?miR?221/222海綿是特異靶向乳腺癌細胞內miR?221/222的新型靶向復合物，所述hTERT?miR?221/222海綿是由人端粒酶逆轉錄酶啟動子和miR?221/222海綿組成。所述hTERT?miR?221/222海綿可在逆轉乳腺癌的他莫昔芬耐藥中應用。所述hTERT?miR?221/222海綿可在乳腺癌細胞中穩定高效表達，從而逆轉他莫昔芬耐藥以及抑制腫瘤細胞的生長侵襲，在正常細胞中低表達甚至不表達，從而不影響正常細胞生長，因此副作用較小。

技術領域

本發明涉及乳腺癌內分泌耐藥的治療，尤其是涉及hTERT-miR-221/222海綿及其在逆轉乳腺癌的他莫昔芬耐藥中的應用。

背景技術

乳腺癌ER/PR陽性病人，術后5年他莫昔芬治療減少了51％的復發率和28％的死亡率，但是長期使用會導致TAM耐藥，這是乳腺癌患者出現復發難治的重要原因，目前臨床上暫無有效逆轉TAM耐藥的方法。目前研究發現，乳腺癌TAM耐藥時miR221、miR222、miR181、miR375、miR21、miR155、miR29a、miR101等表達升高，miR200家族、miR15a/16、miR342、miR27等表達降低。另外，研究證實，TAM耐藥時的乳腺癌內分泌患者循環外泌小體中miR221和miR222水平升高。抑制miR155、miR221、miR222、miR181b、miR29a表達，可逆轉乳腺癌細胞對TAM的耐藥([1]Huber-Keener KJ,Liu X,Wang Z,Wang Y,Freeman W,Wu S,Planas-SilvaMD,Ren X,Cheng Y,Zhang Y et al:Differential gene expression in tamoxifen-resistant breast cancer cells revealed by a new analytical model of RNA-Seqdata.PLoS One 2012,7(7):e41333)。這些都表明，通過靶向TAM耐藥相關的miRNAs，可提高腫瘤細胞對TAM的敏感性，目前，miRNAs抑制劑有幾種不同類型，如鎖核酸(一種反義核酸)、antagomirs(反義RNA)以及擬miRNA，都使表達異常的miRNA重新恢復正常表達。miRNA“海綿”(Sponges)技術自Phillip A.Sharp提出后([2]Ebert MS,Neilson JR,Sharp PA:MicroRNA sponges:competitive inhibitors of small RNAs in mammalian cells.NatMethods 2007,4(9):721-726)，越來越多的團隊成功地利用多拷貝、不完全互補的miRNA反義序列-寡脫氧核苷酸特異吸附miRNA，以降低成熟miRNA含量。例如2014年，Moshiri等在肝癌細胞株中應用miR-221Sponges解除了miR-221對p27細胞周期蛋白阻滯蛋白的抑制作用([3]Moshiri F,Callegari E,D'Abundo L,Corra F,Lupini L,Sabbioni S,Negrini M:Inhibiting the oncogenic mir-221by microRNA sponge:toward microRNA-basedtherapeutics for hepatocellular carcinoma.Gastroenterol Hepatol Bed Bench2014,7(1):43-54)，而Liu等在結腸癌小鼠模型中應用miR-221/miR-222Sponges抑制了結腸癌的生長([4]Liu Y,Cui H,Wang W,Li L,Wang Z,Yang S,Zhang X:Construction ofcircular miRNA sponges targeting miR-21or miR-221and demonstration of theirexcellent anticancer effects on malignant melanoma cells.Int J Biochem CellBiol 2013,45(11):2643-2650)。