[發(fā)明專利]一種規(guī)?；焖贁U繁山藥組培苗的生產方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910362998.2
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN110050699A
• 公開（公告）日: 2019-07-26
• 發(fā)明（設計）人: 李麗紅;陳芝華;華樹妹;張楊文;陳仕朋;李清;鄧才生;葉榕弟
• 申請（專利權）人: 三明市農業(yè)科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 泉州市博一專利事務所(普通合伙) 35213
• 代理人: 方傳榜;蔡俊旭

一種規(guī)?；焖贁U繁山藥組培苗的生產方法，分別利用固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)的各自優(yōu)點，采用前期固體培養(yǎng)和后期淺層液體培養(yǎng)相結合的培養(yǎng)模式，其中，固體培養(yǎng)基配方為MS+BA 0.5～1.0mg/L + AD 5～10mg/L +IBA 0.3～0.5mg/L + 蔗糖30g/L+瓊脂4.5g/L；液體培養(yǎng)基配方為MS+BA 0.5～1.0mg/L + AD 5～10mg/L +IBA 0.3～0.5mg/L + 蔗糖30g/L；并優(yōu)化培養(yǎng)基配方組成以降低山藥組培苗繼代增殖過程中的有害物質等措施，顯著提高山藥組培苗繼代增殖系數(shù)、縮短繼代周期，減少繼代次數(shù)，降低生產成本且更易實現(xiàn)山藥組培苗生產的精簡化和規(guī)模化水平，是一種加快山藥組培苗繁育速度的有效方法。

技術領域

本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)技術領域，尤其是指一種規(guī)?；焖贁U繁山藥組培苗的生產方法。

背景技術

山藥屬薯蕷科薯蕷屬具雙子葉植物特征的單子葉纏繞蔓性藤本植物，近年來隨著山藥產業(yè)鏈的不斷完善以及深加工產品的不斷豐富，山藥產業(yè)化種植面積不斷擴大，產業(yè)前景良好。

山藥種質退化問題是影響山藥產業(yè)可持續(xù)發(fā)展的核心問題，利用植物組織培養(yǎng)的方法進行山藥種苗脫毒復壯并進行規(guī)?；瘮U繁應用，是解決目前山藥種質退化問題的最有效方法。目前山藥組織培養(yǎng)研究報道較多，但大多還處于小規(guī)模研究階段，真正規(guī)?；瘧玫缴a實際的少有報道。究其原因主要還是山藥組培繁殖系數(shù)較低，未能達到生產上快繁的目的，組培苗生產成本較高，無法在短期內向市場提供大量低成本的優(yōu)質組培苗（薯）。如何降低組培苗生產成本、提高繁殖系數(shù)，加快組培苗繁育速度成為制約山藥組培苗大規(guī)模生產應用的瓶頸。

發(fā)明內容

本發(fā)明提供一種規(guī)?；焖贁U繁山藥組培苗的生產方法，其主要目的在于克服山藥組培繁殖系數(shù)較低，未能達到生產上快繁的目的的缺陷。

為解決上述技術問題，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種規(guī)?；焖贁U繁山藥組培苗的生產方法，包括以下步驟：

1)母瓶的準備：對山藥外植體進行剪切，并取帶芽節(jié)段8～10株接種于固體培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)40～45天，其間進行無菌性檢測；所述固體培養(yǎng)瓶中具有pH值為5.8～6.2的固體培養(yǎng)基；所述固體培養(yǎng)基配方：MS+BA 0.5～1.0mg/L + AD 5～10mg/L +IBA 0.3～0.5mg/L + 蔗糖30g/L+瓊脂4.5g/L；

2)將步驟1中固體培養(yǎng)瓶內制得的組培苗在無菌條件下切割成復數(shù)個小叢塊；

3)取復數(shù)個液體培養(yǎng)瓶，所述液體培養(yǎng)瓶中具有pH值為5.8～6.2的液體培養(yǎng)基；在每個液體培養(yǎng)瓶中接種10～12個所述小叢塊進行淺層液體培養(yǎng)，培養(yǎng)周期為28～32天；所述液體培養(yǎng)基配方：MS+BA 0.5～1.0mg/L + AD 5～10mg/L +IBA 0.3～0.5mg/L + 蔗糖30g/L；

4)將所述液體培養(yǎng)瓶內制得的組培苗再次在無菌條件下切割成復數(shù)個小叢塊，并再次以每個液體培養(yǎng)瓶接種10～12個小叢塊的數(shù)量均勻分配到復數(shù)個液體培養(yǎng)瓶中進行淺層液體培養(yǎng)，每個液體培養(yǎng)瓶內均具有所述液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)周期為28～32天；

5)反復進行步驟4以持續(xù)8～10輪的淺層液體培養(yǎng)，并且最后一輪淺層液體培養(yǎng)的培養(yǎng)周期為43～47天。

進一步的，所述MS包括以下成分:硝酸銨1650mg/L、硝酸鉀1900mg/L、氯化鈣440mg/L、硫酸鎂370mgL、磷酸二氫鉀170mg/L、硫酸錳22.3mg/L、硫酸鋅8.6mg/L、氯化鈷0.025mg/L、硫酸銅0.025mg/L、硼酸6.2mg/L、鉬酸鈉0.25mg/L、碘化鉀0.83mg/L、硫酸亞鐵27.8mg/L、乙二胺四乙酸二鈉37.2mg/L、煙酸0.5mg/L、維生素B₆ 0.5 mg/L、維生素B₁0.1mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L。