[發明專利]一種與水稻稻瘟病抗性基因緊密連鎖的分子標記的應用有效
| 申請號： | 201910362959.2 | 申請日： | 2019-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN109913580B | 公開（公告）日： | 2022-05-20 |
| 發明（設計）人： | 韋新宇;曾躍輝;黃建鴻;張銳;尚偉 | 申請（專利權）人： | 三明市農業科學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 泉州市博一專利事務所(普通合伙) 35213 | 代理人： | 方傳榜;蔡俊旭 |
| 地址： | 365509 *** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 水稻 稻瘟病 抗性 基因 緊密 連鎖 分子 標記 應用 | ||
1.一種與水稻稻瘟病抗性基因緊密連鎖的分子標記的應用，其特征在于：所述分子標記由以下分子標記引物擴增得到：
InDel-19 正向：5’AAGGAGATCTGGTATGTGTGCG 3’；
InDel-19 反向：5’AGTTTGGGGTAGTGAAATGCGA 3’；
InDel-25 正向：5’CCTGGTCTAAAGCGCACCTA 3’；
InDel-25 反向：5’CGCCATGGATTCGTTCGACT 3’；
InDel-27 正向：5’TCGGTGCTTTAGATATGTTTTGCT 3’；
InDel-27 反向：5’ACAACTCAAACCAAGCTTCTCA 3’；
所述分子標記引物用于水稻稻瘟病抗性基因的鑒定，所述鑒定包括如下步驟：
a)以待鑒定水稻單株材料的DNA為模板；
b)用所述分子標記引物對步驟a）中的DNA進行PCR擴增獲得擴增產物；
c)利用8%非變性聚丙烯酰胺凝膠對步驟b）中的擴增產物進行凝膠電泳分離分析，通過核酸染料染色觀察，出現不同分子量大小的帶型；
d)若所述帶型中存在由分子標記引物InDel-19、InDel-25和InDel-27分別擴增出的241bp、250bp和243 bp的特異性條帶，則所述待鑒定水稻單株為含有稻瘟病抗性基因的植株。
2.如權利要求1所述的一種與水稻稻瘟病抗性基因緊密連鎖的分子標記的應用，其特征在于：步驟b）中，所述PCR擴增的反應體系按總體積10μL計，包括如下各組分：5.0μL PCRMasterMix、0.5μL 正向引物、0.5μL 反向引物、0.8μL DNA、3.2μL ddH2O。
3.如權利要求1所述的一種與水稻稻瘟病抗性基因緊密連鎖的分子標記的應用，其特征在于：步驟b）中，所述PCR擴增的反應條件為：94.0℃預變性5min；94.0℃變性30S，55℃復性30S，72℃延伸1min，35個循環；72℃延伸7min，4℃保存。
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