[發明專利]L-脯氨酸在提高冬蟲夏草菌芽生孢子數量和菌絲生物量中的應用

有效

• 申請號: 201910362836.9
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN110024623B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發明（設計）人: 劉桂清;曹莉;韓日疇
• 申請（專利權）人: 廣東省科學院動物研究所
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;A01G18/40;A01G18/20
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 胡素麗;劉明星

本發明公開了L?脯氨酸在提高冬蟲夏草菌芽生孢子數量和菌絲生物量中的應用。本發明針對冬蟲夏草菌液體發酵過程中如何提高菌絲生物量以及人工仿生培養蟲菌結合冬蟲夏草過程中如何得到大量感染用芽生孢子的問題，在冬蟲夏草菌培養基中添加L?脯氨酸，誘導冬蟲夏草菌高效產生芽生孢子，添加L?脯氨酸的培養基在接入冬蟲夏草菌孢子培養30d后芽生孢子數量較未添加組提高1.49～5.26倍，培養45d后的芽生孢子數量提高17～52.6倍，培養60d后菌絲干重提高15.67～66.44％。本發明能更高效獲得芽生孢子用于感染蝙蝠蛾仿生培養蟲菌結合冬蟲夏草，同時能提高冬蟲夏草菌液體發酵獲得菌絲體的效率，縮短冬蟲夏草人工培養的時間，降低培養成本。

技術領域：

本發明屬于真菌培養技術領域，具體涉及L-脯氨酸在提高冬蟲夏草菌芽生孢子數量和菌絲生物量中的應用。

背景技術：

冬蟲夏草Ophiocordyceps sinensis是我國傳統的名貴中藥材，與人參、鹿茸被譽為中華醫學三大寶。冬蟲夏草是由冬蟲夏草菌(又名中華被毛孢，中國被毛孢)侵染蝙蝠蛾科Hepialidae幼蟲形成的僵蟲與真菌子座復合體。冬蟲夏草生境特殊(僅在高海拔高寒草甸環境自然繁衍)，生長速度緩慢，周期較長，自然資源極為有限。雖然冬蟲夏草已被列入《國家重點保護野生植物名錄》二級保護物種，但冬蟲夏草的過度采挖并沒有得到有效遏制。在棲息地退化、全球氣候變暖，尤其是冬蟲夏草的過度開發利用等多種因子的綜合影響下，天然冬蟲夏草資源蘊藏量急劇下降(Hopping KA,Chignell SM,Lambin EF.The demiseofcaterpillar fungus in the Himalayan region due to climate change andoverharvesting.Proc Natl Acad Sci USA.2018,115:11489-11494)。

我國自20世紀70年代后期就開始冬蟲夏草菌人工培養技術，通過對冬蟲夏草菌無性型菌絲體的發酵培養已開發生產出多種替代產品，如冬蟲夏草菌發酵菌絲體制成的“百令膠囊”已作為國家重要一類新藥。另外，通過模擬青藏高原生態環境，利用冬蟲夏草菌侵染蝙蝠蛾幼蟲成功培養出冬蟲夏草。因此，如何提高冬蟲夏草菌絲深層發酵技術，提高菌絲生物量，有利于節約菌絲培養時間和成本；另外，利用注射芽生孢子的方式感染蝙蝠蛾幼蟲能縮短仿生培養冬蟲夏草周期，如何快速獲得大量用于感染用的芽生孢子對冬蟲夏草人工培養非常重要。

發明內容：

基于上述問題，本發明的目的是提供一種L-脯氨酸在提高冬蟲夏草菌芽生孢子數量和菌絲生物量中的應用。在冬蟲夏草菌培養基中加入L-脯氨酸能提高培養液中冬蟲夏草菌芽生孢子數量以及冬蟲夏草菌絲生物量，為冬蟲夏草人工培養產業提供重要的技術支撐。

本發明通過實驗發現，在冬蟲夏草菌培養基中加入L-脯氨酸可以提高冬蟲夏草菌芽生孢子的數量和菌絲生物量。

因此，本發明的第一個目的是提供L-脯氨酸在提高冬蟲夏草菌芽生孢子數量和菌絲生物量中的應用。

所述的應用是在接種冬蟲夏草菌的培養基中加入L-脯氨酸，然后進行培養。

本發明的第二個目的是提供L-脯氨酸在制備提高冬蟲夏草菌芽生孢子數量和菌絲生物量制劑中的應用。

本發明的第三個目的是提供一種提高冬蟲夏草菌芽生孢子數量和菌絲生物量的方法，將冬蟲夏草菌接種至添加有L-脯氨酸的培養基中培養，獲得冬蟲夏草菌芽生孢子和菌絲。

所述的培養基優選為液體培養基。

所述的L-脯氨酸，其在液體培養基中的濃度為2.5mg/L-30g/L。

所述的冬蟲夏草菌優選為冬蟲夏草菌孢子液。

所述的液體培養基優選為每150mL含有30g土豆、1.5g蛋白胨、3g麥芽糖、0.08g硫酸鎂、0.25g磷酸二氫鉀、3mg維生素B₁，余量為水。