[發明專利]一種野生蟬花多糖提取方法及其應用

在審

• 申請號: 201910346629.4
• 申請日: 2019-08-27
• 公開（公告）號: CN112442134A
• 公開（公告）日: 2021-03-05
• 發明（設計）人: 余文敏;陳曄;李翔;張紅芳;柯秀梅;彭瑾;葉萍
• 申請（專利權）人: 九江學院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P39/06
• 代理公司: 南京中律知識產權代理事務所(普通合伙) 32341
• 代理人: 沈振濤

本發明提供了一種野生蟬花多糖的提取方法，包括以下步驟：水提：稱取野生蟬花，在提取時間40?55min、提取溫度30?90℃、料液比1:5?1:50的條件下用超聲波輔助水提蟬花多糖；純化：上清液離心，加入乙醇靜置，離心得沉淀，加入去離子水溶解，再采用Sevag法除去蛋白，即得蟬花多糖。本發明還提供了野生蟬花多糖提取的研究方法。本發明利用曲面優化的設計方法對野生蟬花多糖提取工藝優化，并進行了多糖含量的比較，且進行了抗氧化能力的研究。

技術領域

本發明屬于中藥領域，特別涉及一種野生蟬花多糖提取方法，還涉及野生蟬花多糖的應用，還涉及野生蟬花多糖提取工藝的研究方法。

背景技術

蟬花為麥角菌科真菌大蟬草的分生孢子階段即蟬棒束孢菌及其寄主山蟬幼蟲的干燥體，屬蟲草類貴重藥材,具有安神解痙、滋補強壯、透疹明目之功效。中醫認為蟬花性寒、味甘、無毒，具有解痙、散風熱、退翳障的功效，主治小兒驚風夜啼、咬牙、咳嗽、喉嚨癰腫等癥，蟬花中主要的藥用活性成分有以下幾種：蟲草酸、蟲草多糖、生物堿、蟲草素、腺苷等。

在蟬花的多種成分中，蟬花多糖是含量最多的。目前，對于蟬花的研究主要包括野生蟬花和人工培育蟬花孢梗束、蟬花無性型菌株代謝產物的活性物質含量及藥理作用分析方面。有研究者以提取時間，提取溫度、料液比、提取次數為自變量，采用正交試驗，研究了這四個因素對蟬花多糖提取率的影響，以及蟬花多糖的抗菌作用，但其最佳條件較為寬泛，條件變化時，提取率的變化不明顯，且此方法的提取率不理想；另外有研究者利用超聲波輔助的方法進行多糖的提取，但其只對提取時間、提取溫度、料液比等三個因素進行了正交試驗，只比較了這三個因素對蟬花多糖提取率的影響大小，并未對蟬花活性開展進一步的研究。謝飛利用前人的提取方法對蟬花的抗腫瘤活性進行了研究，但其對蟬花多糖的提取方面沒有進行說明；翁梁對野生蟬花多糖和人工蟬花多糖進行了抗菌活性的研究，但沒有對兩種蟬花多糖的含量進行比較；張紅霞、葛飛等人對人工蟬花菌絲體和天然蟬花的化學成分進行了比較，結果顯示人工蟬花的菌絲體中的名種成分均高于天然蟬花，但并未將人工蟬花菌基與野生蟬花進行比較。此外，彭秀秀、朱戎、趙曉露等人對蟬花、蟬花提取物及蟬花菌絲的一些藥理功能如免疫調節、改進腎功能、改善糖尿病等也進行了大量的實驗。

發明內容

發明目的：本發明的目的是提供一種野生蟬花多糖提取方法，還涉及野生蟬花多糖的應用，還涉及野生蟬花多糖提取工藝的研究方法。

技術方案：為了解決現有技術的缺陷，本發明提供了一種野生蟬花多糖的提取方法，包括以下步驟：

(1)水提：稱取野生蟬花，在提取時間40-55min、提取溫度30-90℃、料液比1:5-1:50的條件下用超聲波輔助水提蟬花多糖；

(2)純化：上清液離心，加入乙醇靜置，離心得沉淀，加入去離子水溶解，再采用Sevag法除去蛋白，即得蟬花多糖。

提取時間為52.22min。

提取溫度為69.35℃。

料液比為1:21.76g/mL。

步驟(2)中，純化工藝具體為：以4000r/min離心15min得上清液，加入3倍體積的體積分數為95％的冰置乙醇，放置冰箱過夜；以4000r/min離心15min，沉淀加入去離子水溶解后再采用Sevag法除去蛋白。

本發明還提供了上述蟬花多糖作為抗氧化劑的應用。

本發明還提供了上述蟬花多糖作為還原劑的應用。

本發明還提供了野生蟬花多糖提取的研究方法，包括以下步驟：

(1)利用單因素實驗方法，用超聲波輔助提取蟬花多糖，考察提取時間、提取溫度、料液比對蟬花多糖提取率的影響；