[發明專利]一種復合生物活性因子的提純濃縮方法及其濃縮液

在審

• 申請號: 201910340559.1
• 申請日: 2019-04-25
• 公開（公告）號: CN110028572A
• 公開（公告）日: 2019-07-19
• 發明（設計）人: 雷艷
• 申請（專利權）人: 雷艷
• 主分類號: C07K14/485
• 分類號: C07K14/485;C07K14/515;C07K14/50;C07K14/495;C07K14/475;C07K14/49;C07K14/505;C07K14/53;C07K14/54;C07K1/34
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616
• 代理人: 尚欣

本發明公開了一種復合生物活性因子的提純濃縮方法及其濃縮液，將含有復合生物活性因子的生物組織培養液加入有機溶劑，并持續攪拌至均勻，得到生物組織混合液，將得到的生物組織混合液放入至壓力處理機內，進行升壓處理，快速卸壓至常壓，并取出生物組織混合液，進行離心處理，離心完成后，進行過濾處理，除去生物組織混合溶液內的殘留的生物組織雜質，得到生物組織混合溶液的澄清液，并使用超濾膜過濾掉澄清液，得到含有活性因子的生物組織的超濾液，并將超濾液進行再一次的提純濃縮，得到含有復合生物活性因子的濃縮液。該復合生物活性因子的提純濃縮方法及其濃縮液，對皮膚術后可以加速修復，并具有撫平細紋，延緩皮膚老化等功能。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種復合生物活性因子的提純濃縮方法及其濃縮液。

背景技術

活性因子，也稱生長因子，活性生長因子，活性細胞因子，是一類通過與特異的、高親和的細胞膜受體結合，調節細胞生長與其他細胞功能等多效應的多肽類物質。活性因子是具有調節細胞生長與分化功能的多種氨基酸的組合體，也稱為“肽”，肽是精準的蛋白質片斷，故活性因子又叫做活性蛋白因子，分布在人體各組織內，主要存在于血小板和各種成體與胚胎組織及大多數培養細胞中。含量極其少但是對人體細胞調節功能卻非常重要，從分子結構來看，細胞活性因子都是小分子的多肽，多數由100個左右氨基酸組成。

隨著社會的發展，復合活性因子在醫療和護膚上方的使用越來越高，而含有復合活性因子的濃縮液的提取濃縮與制備，一般需要對含有復合活性因子的組織培養液進行濃縮提取，而現有的濃縮提取方法，其濃縮提取的成本高，效率低，且在提取的過程中無法保證復合活性因子的有效活性，利用率差。

發明內容

本發明的目的在于提供一種復合生物活性因子的提純濃縮方法及其濃縮液，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種復合生物活性因子的提純濃縮方法，包括以下步驟：

S1，將含有復合生物活性因子的生物組織培養液加入有機溶劑，并持續攪拌至均勻，得到生物組織混合液；

S2，將S1得到的生物組織混合液放入至壓力處理機內，進行升壓處理，加壓至120MPa～700MPa，并保持5～10分鐘后，快速卸壓至常壓，并取出生物組織混合液；

S3，將S2取出的生物組織混合溶液加入到離心機內，進行離心處理，離心完成后，經100nm的過濾介質進行過濾處理，除去生物組織混合溶液內的殘留的生物組織雜質，得到生物組織混合溶液的澄清液；

S4，將S3得到的生物組織混合溶液的澄清液取出，并使用超濾膜過濾掉澄清液中的分子量大于3000～5000道爾頓的有機大分子物質，得到含有活性因子的生物組織的超濾液；

S5，將S4得到的超濾液經納濾技術進行分濃縮處理，以除去超濾液中含有的有機溶劑，并將超濾液進行再一次的提純濃縮，得到含有復合生物活性因子的濃縮液。

優選的，所述復合生物活性因子包括：人表皮生長因子HEGF、血管內皮生長因子VEGF、成纖維細胞生長因子FGF、轉化生長因子～β1TGF～β1、轉化生長因子～β2TGF～β2、類胰島素一號增長因子IGF～1、類胰島素二號增長因子IGF～2、角質細胞生長因子KGF、血小板衍生生長因子PDGF、紅細胞生長素EPO、集落刺激因子CS和白細胞介素類生長因子。

優選的，S1中，所述生物組織培養液為冷凍的含有復合生物活性因子的組織條件培養液，經化凍后使用。

優選的，S1中，有機溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸甲酯和乙酸乙酯中的任一種或多種組合。

優選的，S2中，升壓處理的時間控制在2～5min，卸壓的時間控制在5～10s內。