[發明專利]一種針對EGFR L858R基因突變的特異性T細胞受體及其應用

在審

• 申請號: 201910338977.7
• 申請日: 2019-04-25
• 公開（公告）號: CN111848781A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 杜學明;李鳳娥;霍沖;鄧麗剛;鄒慶薇;王亞玲
• 申請（專利權）人: 天津亨佳生物科技發展有限公司
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;C12N15/867;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 天津市君硯知識產權代理有限公司 12239
• 代理人: 張東浩

本發明提供一種針對EGFR L858R基因突變的特異性TCR及其應用，所述TCR具有結合衍生自EGFR L858R基因突變的新抗原肽KITDFGRAK?HLA?A*1101復合物的特性，所述TCR包含α鏈和β鏈的可變區和恒定區。經過該類TCR修飾的T細胞具有對EGFR L858R基因突變的HLA?A*1101腫瘤細胞的特異性殺傷作用。另外，本發明還提供了用于治療涉及表達所述基因突變的腫瘤的藥物組合，具有特異性強，個體化治療效果好的特點。

技術領域

本發明涉及基因工程及腫瘤免疫治療領域，具體涉及一種針對EGFR L858R基因突變的特異性T細胞受體及其應用。

背景技術

腫瘤免疫治療是通過重新啟動并維持腫瘤-免疫循環，恢復機體正常的抗腫瘤免疫反應，從而控制與清除腫瘤的一種治療方法。TCR（T cell receptor）療法即T細胞受體療法，在該療法中，分離出內源的T細胞，加以工程化改造，并輸注回人體。這樣一來，帶有靶向癌細胞能力的T細胞數量將大增。這種方法除了能像細胞毒性化療和靶向治療快速殺滅腫瘤外，還避免了疫苗和免疫檢查點抑制劑療法的延遲效應。TCR-T是繼腫瘤手術、放療、化療、靶向治療之后的最有發展前景的腫瘤治療技術之一，無論是國際還是國內都是目前腫瘤免疫治療的研究熱點。

T細胞受體（簡稱TCR）是所有T細胞表面的特征性標志，具有識別抗原呈遞細胞（APC）上人類主要組織相容性復合體（MHC）分子-抗原肽復合體的能力。TCR 是由α、β 兩條肽鏈構成的異二聚體，每條肽鏈分為可變區（V區）、恒定區（C區）、跨膜區和胞質區等幾部分；其胞質區很短，信號傳遞主要通過與其以非共價鍵結合的CD3 分子進行。TCR 分子屬于免疫球蛋白超家族，其抗原特異性存在于V 區；V 區又各有三個高變區CDR1、CDR2、CDR3，其中以CDR3 變異最大，直接決定了TCR 的抗原結合特異性。在TCR 識別MHC-抗原肽復合體時，CDR3可直接與抗原肽相結合。

TCR在識別APC或者靶細胞上的MHC分子所提呈的抗原肽時，既要識別抗原肽，同時也要識別自身MHC分子的多態性部分，此現象即MHC限制性。T細胞通過特異性T細胞受體識別腫瘤細胞表面抗原肽-MHC復合體而被激活，活化后的T細胞可以直接溶解腫瘤細胞，或通過分泌細胞因子如干擾素、腫瘤壞死因子等抑制腫瘤生長。CD8+T細胞介導的特異性MHC-I類分子限制細胞免疫功能，在抗腫瘤免疫中尤其重要。

HLA（human lymphocyte antigen，人類淋巴細胞抗原），受控于MHC的基因簇，是具有高度多態性的同種異體抗原，是目前所知人體最復雜的遺傳多態性系統，有幾十個基因座位，每個基因座位又有幾十個等位基因，且呈共顯性表達。HLA有A、B、C、D和DR 5個位點，分別稱為HLA-A，HLA-B，HLA-C，HLA-D和HLA-DR。

EGFR（epidermal growth factor receptor family）人類表皮生長因子受體家族屬于酪氨酸激酶受體家族，也被稱作HER家族或erbB家族。EGFR信號通路對細胞的生長、增殖和分化等生理過程發揮重要的作用。EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其相關信號通路中關鍵因子的活性或細胞定位異常，均會引起腫瘤、糖尿病、免疫缺陷及心血管疾病的發生。EGFR誘導癌癥至少通過3種機制：EGFR配體的過表達、EGFR的擴增或EGFR的突變活化，其中以EGFR的突變活化為主要機制。EGFR基因是由28個外顯子組成，其中外顯子18-21是常見的基因突變位點，也是與易瑞沙等EGFR-TKI結合的位點。通常來說，EGFR的外顯子19缺失和外顯子21的L858R兩個突變對于易瑞沙靶點是敏感的。因此EGFR的外顯子19缺失和外顯子21的L858R突變可以作為腫瘤患者是否適用EGFR-TKI的一個重要的判斷標準，其中L858R基因突變，也就是EGFR蛋白的第858個氨基酸從L(亮氨酸)突變成了R(精氨酸)。