[發明專利]一種發酵生產十六碳二元酸的方法、十六碳二元酸及其制備方法

在審

• 申請號: 201910338907.1
• 申請日: 2019-04-25
• 公開（公告）號: CN111850060A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 鮑家偉;趙宏圖;徐敏;劉修才
• 申請（專利權）人: 上海凱賽生物技術股份有限公司;CIBT美國公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12N1/16;C12R1/74;C12R1/72
• 代理公司: 北京同立鈞成知識產權代理有限公司 11205
• 代理人: 劉會景;劉芳

1.一種發酵生產十六碳二元酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

對熱帶假絲酵母或者清酒假絲酵母進行擴大培養，直至得到的種子液在稀釋30倍時的光密度值OD₆₂₀達到0.5以上；

將所述種子液接入發酵培養基中進行發酵，在發酵進行至少15小時后以0.05％～1.00％的比例向發酵液中添加吐溫，且在發酵液稀釋30倍時的光密度值OD₆₂₀達到0.6以上時開始加入正十六烷；在上述發酵過程中，維持發酵液的pH值在7以下，得到十六碳二元酸發酵液；

前述百分比為相對于發酵培養基的質量體積比。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，對所述熱帶假絲酵母或者清酒假絲酵母進行擴大培養，包括：

將熱帶假絲酵母或者清酒假絲酵母在搖瓶中進行活化培養，待搖瓶種子在稀釋30倍時的光密度值OD₆₂₀達到0.5以上，將所述搖瓶種子接入裝有種子培養基的種子罐中進行種子培養，直至得到的種子液在稀釋30倍時的光密度值OD₆₂₀達到0.5以上。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述種子培養基包括以下成分：蔗糖1.1％～3.1％、酵母膏0.1％～0.5％、玉米漿0.1％～0.6％、尿素0.1％～0.6％，磷酸二氫鉀0.4％～1.2％以及消泡劑0.02％～0.10％。

4.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于，在所述種子培養過程中，控制溫度為28～32℃；和/或，控制風量為0.3～0.7vvm；和/或，控制壓力為0.05～0.15MPa。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發酵培養基包括以下成分：葡萄糖1.0％～5.0％、酵母膏0～0.5％、玉米漿0～0.8％、硫酸銨0.1％～0.5％、硝酸鉀0.1％～0.5％、磷酸二氫鉀0.1％～0.8％，硫酸鎂0.1％～0.3％以及消泡劑0.02％～0.10％。

6.根據權利要求1或5所述的方法，其特征在于，將所述種子液以10v/v％～30v/v％的接種量接入發酵培養基中進行發酵；和/或，在所述發酵過程中，控制溫度為28～32℃；和/或，控制風量為0.3～0.7vvm；和/或，控制壓力為0.05～0.15MPa；和/或，控制pH值為5.0～7.0。

7.根據權利要求1-6任一項所述的方法，其特征在于，所述吐溫的添加時間為發酵15h～90h，優選為發酵20h～90h，更優選為30h～50h；和/或，所述吐溫的添加量為0.05％～0.50％，更優選為0.05％～0.20％。

8.根據權利要求1或6所述的方法，其特征在于，在發酵6h后，向所述發酵培養基中補加糖水溶液，以將發酵液中的糖濃度維持在0.1％～5％。

9.一種十六碳二元酸的制備方法，其特征在于，包括：按照權利要求1-8任一項所述的方法獲得十六碳二元酸發酵液，并對所述十六碳二元酸發酵液進行分離純化，得到十六碳二元酸。

10.一種十六碳二元酸，其特征在于，是采用權利要求9所述制備方法制得。