[發明專利]具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體及制備方法

在審

• 申請號: 201910338095.0
• 申請日: 2019-04-25
• 公開（公告）號: CN110075083A
• 公開（公告）日: 2019-08-02
• 發明（設計）人: 王曉莉;楊菁;李擁軍;段建偉;陳作觀
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院生物醫學工程研究所
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K47/02;A61K47/42;A61K47/36;A61P9/14
• 代理公司: 天津一同創新知識產權代理事務所(普通合伙) 12231
• 代理人: 陸藝

本發明公開了一種具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體及制備方法,方法為：(1)將二水氯化鈣溶解于水中為溶液一；將無水碳酸鈉溶解于水中為溶液二：將溶液二加入攪拌的溶液一中，沉淀，水洗，離心；(2)向沉淀中加水、加用多酚配制的液體，混勻；加金屬離子水溶液，混勻，加3?(N?嗎啉)丙磺酸水溶液，混勻，離心，水洗，離心得沉淀；(3)重復步驟(2)；(4)加EDTA水溶液，混勻，放置，離心，得沉淀；(5)重復步驟(4)；(6)水洗沉淀；水混懸，凍干。實驗證明本發明的微囊載體具有良好H₂O₂清除能力，在小鼠下肢缺血模型中證實其促微血管生成效果。

技術領域

本發明涉及一種具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊及制備方法及在制備下肢缺血治療藥物的應用，屬于生物醫學、微囊載體、藥物遞送治療領域。

背景技術

下肢缺血疾病發病率高，嚴重患者年截肢率高達30％。目前此類疾病的臨床手術及介入治療存在術后血管再狹窄或閉塞等問題，而基因及干細胞治療的效果也并不理想，且費用較高；因此有效改善缺血微環境并誘導血管生成是治療此類疾病的關鍵。近年生物材料技術的研究已經涵蓋多種疾病領域。金屬離子，如金屬銅離子(Cu²⁺)、金屬鋅離子(Zn²⁺)等已經在多種疾病研究中被證實具有促血管生成作用，但大劑量金屬粒子對機體會有毒副作用。實現金屬離子緩釋既可以發揮其生理功能同時也能降低其毒副作用。目前，尚未有具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體的報道。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體。

本發明的第二個目的是提供一種具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體的制備方法。

本發明的第三個目的是提供具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體在制備下肢缺血治療藥物的應用。

本發明的技術方案概述如下：

一種具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體的制備方法，包括如下步驟：

(1)將10-2000mg二水氯化鈣溶解于10-50ml水中，得到溶液一；將10-2000mg無水碳酸鈉溶解于10-50ml水中，得到溶液二：將全部溶液二加入攪拌的全部溶液一中，再持續攪拌10-60s，靜止1-10min，在2000rpm-13000rpm，離心3-5min，沉淀用水洗1-3次，每次1-50mL，再離心；攪拌速度為400-700rpm；

(2)向步驟(1)獲得的沉淀中加入水至4-20mL；加入0.5-5mL 1-100mg/mL的以水為溶劑配制的含多酚的液體，混勻；加入0.5-5mL 0.5-50mg/mL金屬離子水溶液，混勻，加入0.5-50mL1-20mM pH＝7.4的3-(N-嗎啉)丙磺酸水溶液，混勻，在2000-13000rpm條件下，離心5-10min；用水洗1-3次，離心得沉淀；

(3)重復步驟(2)2-4次；

(4)將步驟(3)獲得的產物加入10-30mL、5-100mM EDTA水溶液中，混勻，放置10-30min，在2000-13000rpm條件下，離心，得沉淀；

(5)重復步驟(4)0-2次；

(6)用水洗步驟(5)獲得的沉淀2-4次；將所得沉淀用水混懸，凍干得到具有ROS響應性及金屬離子緩釋功能的金屬多酚微囊載體。

多酚為兒茶酚、單寧酸、鄰苯三酚、蘆丁、槲皮素、沒食子酸、鞣酸、兒茶酚改性的海藻酸或明膠。

金屬離子為鐵離子、銅離子、鋅離子、鎂離子、鋁離子、錳離子或鈦離子。