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[發(fā)明專利]谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物、其應(yīng)用、電化學(xué)傳感器及檢測方法在審

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201910337020.0 申請日: 2019-04-25
公開(公告)號: CN110133079A 公開(公告)日: 2019-08-16
發(fā)明(設(shè)計)人: 吳岸峰;王繼華 申請(專利權(quán))人: 廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司
主分類號: G01N27/327 分類號: G01N27/327
代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224 代理人: 林青中;曾旻輝
地址: 510663 廣東*** 國省代碼: 廣東;44
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 谷草轉(zhuǎn)氨酶 電化學(xué)檢測 丙酮酸氧化酶 電化學(xué)傳感器 電解質(zhì) 電子媒介體 緩沖液 活性劑 草酰乙酸脫羧酶 天門冬氨酸 第二表面 第一表面 丙氨酸 檢測 應(yīng)用
【權(quán)利要求書】:

1.一種谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,包括第一組合物和第二組合物,所述第一組合物包括水、第一緩沖液、第一電解質(zhì)、第一表面活性劑、第一電子媒介體以及丙酮酸氧化酶,所述第二組合物包括水、第二緩沖液、第二電解質(zhì)、第二表面活性劑、第二電子媒介體、L-天門冬氨酸、L-丙氨酸、草酰乙酸脫羧酶以及丙酮酸氧化酶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第一組合物中的所述丙酮酸氧化酶的濃度為0.1mg/mL~10mg/mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第二組合物中的所述丙酮酸氧化酶的濃度為0.1mg/mL~10mg/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第二組合物中的所述L-天門冬氨酸的濃度為0.1mg/mL~10mg/mL,所述L-丙氨酸的濃度為0.1mg/mL~10mg/mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述草酰乙酸脫羧酶的濃度為0.1mg/mL~10mg/mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第二組合物還包括甘氨酸,所述甘氨酸的濃度為0.1mg/mL~50mg/mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第一組合物和/或所述第二組合物還包括多糖。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第一組合物和/或所述第二組合物還包括二氧化硅。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第一電子媒介體和/或所述第二電子媒介體選自氧化態(tài)的電子媒介體。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述氧化態(tài)的電子媒介體選自氧化態(tài)的醌、氧化態(tài)的醌衍生物、二茂鐵、鐵氰化物以及釕鹽中的一種或多種。

11.根據(jù)權(quán)利要求1-6、10任一項所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物,其特征在于,所述第一緩沖液和/或所述第二緩沖液的pH值為5~9。

12.一種根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物在制備用于谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)傳感器的檢測材料中的應(yīng)用。

13.一種谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)傳感器,其特征在于,所述谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)傳感器包括多個連通的反應(yīng)池,所述反應(yīng)池設(shè)置有反應(yīng)試劑層,至少有一個所述反應(yīng)池的所述反應(yīng)試劑層是由權(quán)利要求1-11任一項所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物中的所述第一組合物經(jīng)干燥形成,至少有一個所述反應(yīng)池的所述反應(yīng)試劑層是由權(quán)利要求1-11任一項所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)檢測組合物中的所述第二組合物經(jīng)干燥形成。

14.一種谷草轉(zhuǎn)氨酶的檢測方法,其特征在于,采用根據(jù)權(quán)利要求13所述的谷草轉(zhuǎn)氨酶電化學(xué)傳感器,并包括以下步驟:

測定已知谷草轉(zhuǎn)氨酶濃度的樣本在所述第一組合物形成的第一所述反應(yīng)試劑層中的第一電流值以及在所述第二組合物形成的第二所述反應(yīng)試劑層中的第二電流值,將所述第二電流值減去所述第一電流值得到相對電流值;

按照預(yù)設(shè)谷草轉(zhuǎn)氨酶濃度梯度測定所述相對電流值,得到谷草轉(zhuǎn)氨酶濃度和所述相對電流值的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

測定待測樣本的所述相對電流值;以及

將所述待測樣本的所述相對電流值代入所述標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到所述待測樣本中的谷草轉(zhuǎn)氨酶的濃度。

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