[發(fā)明專利]黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因及其載體構(gòu)建和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910330809.3
• 申請日: 2019-04-23
• 公開（公告）號: CN110042112A
• 公開（公告）日: 2019-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙清;崔孟穎;柳潔;方譽(yù)民;凱西·馬丁
• 申請（專利權(quán)）人: 上海辰山植物園
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N9/10;C12N15/11;C12P17/06
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 車超平

1.一種黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因，其特征在于，包括SbPFOMT1，SbPFOMT2，SbPFOMT5基因中的至少一種，其中，所述基因序列選自：

1)SEQ ID No.1的DNA序列；

2)由SEQ ID No.1通過一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的添加、刪除、取代而得到的序列，其編碼與SEQ ID No.2功能相同的蛋白質(zhì)；

3)SEQ ID No.3的DNA序列；

4)由SEQ ID No.3通過一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的添加、刪除、取代而得到的序列，其編碼與SEQ ID No.4功能相同的蛋白質(zhì)；

5)SEQ ID No.5的DNA序列；

6)由SEQ ID No.5通過一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的添加、刪除、取代而得到的序列，其編碼與SEQ ID No.6功能相同的蛋白質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因，其特征在于，所述SbPFOMT1基因序列如SEQ ID No.1所示，所述SbPFOMT2基因序列如SEQ ID No.3所示，所述SbPFOMT5基因序列如SEQ ID No.5所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因，其特征在于，所述SbPFOMT1基因的讀碼框位于1-747，所述SbPFOMT2基因的讀碼框位于1-705，所述SbPFOMT5基因的讀碼框位于1-705。

4.一種用于擴(kuò)增如權(quán)利要求2中所述的黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因的引物組合物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的引物組合物，其特征在于，用于擴(kuò)增SbPFOMT1基因的引物包括如SEQ ID No.7～SEQ ID No.8所示序列，用于擴(kuò)增SbPFOMT2基因的引物包括如SEQ IDNo.9～SEQ ID No.10所示序列，用于擴(kuò)增SbPFOMT5基因的引物包括如SEQ ID No.11～SEQID No.12所示序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的引物組合物，其特征在于，所述引物具有Gateway重組位點(diǎn)。

7.一種由權(quán)利要求1所述的黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因編碼的蛋白。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因編碼的蛋白，其特征在于，由SbPFOMT1基因編碼的蛋白序列如SEQ ID No.2所示，由SbPFOMT2基因編碼的蛋白序列如SEQ ID No.4所示，由SbPFOMT5基因編碼的蛋白序列如SEQ ID No.6所示。

9.由權(quán)利要求1所述的黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因構(gòu)建的重組載體、重組微生物、宿主細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系、轉(zhuǎn)基因植物組織或轉(zhuǎn)基因植物。

10.一種如權(quán)利要求1所述的黃芩黃酮苯丙素和類黃酮O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因，或如權(quán)利要求9所述的重組載體、重組微生物、宿主細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系、轉(zhuǎn)基因植物組織或轉(zhuǎn)基因植物在合成甲氧基黃酮類化合物中的應(yīng)用。