[發明專利]用于指導降血脂用藥的SNP位點檢測試劑盒及其使用方法在審
| 申請號： | 201910324276.8 | 申請日： | 2019-04-22 |
| 公開（公告）號： | CN110016503A | 公開（公告）日： | 2019-07-16 |
| 發明（設計）人： | 劉小龍;張捷捷;林東旭;魏國鵬 | 申請（專利權）人： | 南京格致醫學檢驗有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6883 | 分類號： | C12Q1/6883;C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 北京中企鴻陽知識產權代理事務所(普通合伙) 11487 | 代理人： | 汪斌 |
| 地址： | 210000 江蘇省南京市高新開發區中*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 擴增 降血脂 試劑盒 個位 檢測 多重PCR擴增 單個反應 結果指導 實驗成本 相關基因 測序 基因 覆蓋 分析 | ||
1.一種用于指導降血脂用藥的SNP位點檢測試劑盒，包括擴增PCR反應體系，所述擴增PCR反應體系包括PCR預混液和多對PCR引物，其特征在于，所述PCR引物包括：
rs429358&rs7412上游引物AATCGGAACTGGAGGAACAACT
rs429358&rs74122下游引物TGCTCCTTCACCTCGTCCA
rs4149056上游引物AAAGGAATCTGGGTCATACATG
rs4149056下游引物AGTAGACAAAGGGAAAGTGATC；
本試劑盒能夠對APOE(rs429358，rs7412),SLCO1B1(rs4149056)的2個基因的3個SNP位點進行檢測。
2.一種用于指導降血脂用藥的SNP位點檢測試劑盒的使用方法，按照先后順序包括以下步驟：
(1)采用經典的基因組DNA提取方法或是基因組提取試劑盒，從樣本中提取基因組DNA備用；
(2)每管取熒光PCR檢測混合液與Taq酶，振蕩混勻，獲得熒光PCR檢測混合液與Taq酶的共混液；
(3)將待測DNA樣品、ddH2O、多對上游引物REP1、多對下游引物REP2加入裝有共混液的PCR管中，蓋好管蓋，組成PCR反應體系；
(4)對步驟(3)的PCR反應體系進行PCR擴增；
(5)對多重擴增產物純化后送一代測序，同時對APOE(rs429358，rs7412),SLCO1B1(rs4149056)的2個基因的3個SNP位點進行檢測；
(6)根據檢測結果指導患者降血脂用藥。
3.根據權利要求2所述的用于指導降血脂用藥的SNP位點檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，步驟(3)中，所述PCR反應體系的成分組成，包括：共混液10ul，上游引物REP11ul，下游引物REP21ul，基因組DNA10-50ng，ddH2O補足20ul。
4.根據權利要求2所述的用于指導降血脂用藥的SNP位點檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，步驟(4)中，PCR擴增的條件為：S1:95℃預變性15min，S2：95℃變性10s，S3：60℃退火60s，S4：72℃延伸20s，S5：72℃延伸10min，S6：冷卻至4℃，其中S2-S4循環35次。
5.根據權利要求2所述的用于指導降血脂用藥的SNP位點檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，指導使用的糖尿病藥為他汀類藥物。
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