[發明專利]一種去甲基尼古丁降解菌及其生產的菌劑

有效

• 申請號: 201910324063.5
• 申請日: 2019-04-22
• 公開（公告）號: CN110129218B
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 張磊;洪青
• 申請（專利權）人: 鎮江蔚綠生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C02F101/38;C12R1/01
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

本發明公開了一種去甲基尼古丁降解菌及其生產的菌劑。一種去甲基尼古丁降解菌，該微生物是革蘭氏染色陽性的假節菌(Pseudarthrobacter sp.)菌株W1?1，中國典型培養物保藏中心,保藏編號為CCTCC NO.M 2018758。本發明提供了一株能夠降解去甲基尼古丁的菌株W1?1，使用該菌株生產的去甲基尼古丁降解菌劑，具有生產使用成本低，使用方便，去除效果好的優點，適合在煙草加工企業廢水的生化處理池中投加使用，可以減少生化處理系統的啟動時間，并提高去甲基尼古丁的降解效果，將甲基尼古丁的去除率都保持在95％以上，具有很好的應用前景，本發明對于保護生態環境，保護人民的身體健康，具有重要的意義。

技術領域

本發明提供一種去甲基尼古丁降解菌及其生產的菌劑，屬于生物高技術領域，是利用微生物的方法降解去甲基尼古丁，適用于煙草加工企業的廢水處理。

背景技術

去尼古丁和去甲基尼古丁是煙草屬植物中的主要生物堿。尼古丁在大多數商業煙草品種的生物堿含量中占95％,而其結構類似物去甲基尼古丁僅占約3％。但是煙草葉子一旦衰老，去甲基尼古丁含量將顯著增加。研究表明在煙草衰老和固化加工期間，煙葉中大量的尼古丁將轉化為去甲基尼古丁。

去甲基尼古丁能直接誘導吸煙者血漿中蛋白的異常糖基化，能與常用類固醇類藥物發生共價反應，影響藥效和毒性。此外，它還容易轉化為煙草特有亞硝胺類物質(tobacco-specific nitrosamines,TSNAs)，包括亞硝基去甲基尼古丁(nitrosonornicotine,NNN)及4-甲基亞硝胺基-1-3-吡啶基-1-丁酮(4-(N-Nitrosomethylamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone)。這些煙草特異的亞硝胺類物質(TSNAs)對人類健康極為不利。NNN有著極強的動物致癌能力，研究表明它能在大鼠中引起食管和口腔腫瘤。因為它毒性強，所以被國際癌癥研究機構(IARC)列為第I組致癌物質，并且由美國食品和藥物管理局(FDA)監管。據報道，在飲用水氯化過程中去甲基尼古丁也能發生亞硝基化作用形成NNN。

因此有效地控制環境中的去甲基尼古丁的含量,對于維護人類健康有著非常重要的意義，生物修復是以一種以具有污染物降解功能的微生物為基礎的環境友好型的治理環境污染的方法。

發明內容

本發明的目的在于針對生產實踐中的實際問題和需求，開發研制出一種新型的去甲基尼古丁降解菌劑，使用本菌劑可以去除煙草加工企業廢水中的去甲基尼古丁，減輕對環境的污染。

本發明的目的可通過以下技術方案實現：

本發明提供一種去甲基尼古丁降解菌，該微生物是革蘭氏染色陽性的假節菌(Pseudarthrobacter sp.)菌株W1-1，中國典型培養物保藏中心,保藏編號為CCTCCNO.M2018758,主要生物學特性為：G⁺，菌體形態呈棒狀至球狀，無鞭毛，菌落在LB培養基上呈直徑為1-2毫米，乳白色且不透明的凸面圓形。過氧化氫酶陽性，氧化酶和硝酸還原酶陰性，吲哚和VP反應呈陽性。可以在溫度為15～35℃條件下降解甲基尼古丁且以其為唯一碳源進行生長。在實驗室搖瓶培養條件下對去甲基尼古丁的降解率達95％以上。該菌可以用發酵工業通用發酵設備進行生產。

一種用本發明所述的去甲基尼古丁降解菌生產的去甲基尼古丁降解菌劑。

所述的菌劑，優選通過以下方法生產而成：

1)W1-1斜面種接種于LB培養基搖瓶中，振蕩培養至對數期；

2)上述培養好的菌種按5％的接種量接種入升種子罐，培養至對數生長期，種子罐所用的培養基配方為：葡萄糖1.5％(m/v,下文同)，(NH₄)₂SO₄ 1.5％，K₂HPO₄ 0.4％，MgSO₄0.06％，NaCl1.5％，CaCO₃ 0.1％，酵母膏0.04％，pH值7.2-7.5；