[發明專利]檢測環指蛋白32表達水平的試劑的應用和試劑盒

有效

• 申請號: 201910318709.9
• 申請日: 2019-04-19
• 公開（公告）號: CN109852698B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 胡明;陳剛;韓宇鵬
• 申請（專利權）人: 佳木斯大學附屬第一醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/574
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發明屬于生物技術領域，涉及檢測RNF32表達水平的試劑的應用和試劑盒。更具體地，涉及檢測RNF32表達水平的試劑在制備用于結直腸癌輔助診斷和/或結直腸癌患者預后判斷的制劑中的應用以及一種用于結直腸癌輔助診斷和/或結直腸癌患者預后判斷的試劑盒。臨床樣本檢測結果顯示，結直腸癌中RNF32表達較癌旁組織顯著升高(P0.001)；且RNF32高表達不利于結直腸癌患者總體生存(P＝0.0205)。因此，檢測該基因表達變化的試劑可用于結直腸癌預后或者診斷、治療。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，更具體地，涉及檢測環指蛋白32(RNF32)表達水平的試劑在制備用于結直腸癌輔助診斷和/或結直腸癌患者預后判斷的制劑中的應用以及一種用于結直腸癌輔助診斷和/或結直腸癌患者預后判斷的試劑盒。

背景技術

最新的統計數據顯示，癌癥死亡占我國居民全部死因的23.91％，儼然已成為人類健康路上最兇猛的攔路虎之一。2019年1月末，國家癌癥中心在《中華腫瘤雜志》發布了最新完成的中國惡性腫瘤流行情況報告，分析了2015年我國最新癌癥情況(全國腫瘤登記中心的數據通常滯后3年，故本次報告發布數據為2015年登記資料)。據報告估計，2015年全國癌癥發病約392.9萬例，發病率為285.83/10萬，全年死亡約233.8萬人，死亡率為170.05/10萬。這也意味著平均每分鐘有7.5人被診斷為癌癥，有4.4人因癌癥死亡。近10多年來，我國癌癥發病、死亡數持續上升，癌癥發病率每年平均增長約3.9％，死亡率每年平均增長2.5％。結直腸癌是目前最常見的消化道腫瘤之一。最新惡性腫瘤流行病學數據發現，結直腸癌發病率在男性和女性中分別排名第4位及第3位，死亡率為第5位及第4位，城鎮居民發病率更高。而在全球范圍內，結直腸癌與肺癌發病率并列第一，嚴重威脅人類健康。

結直腸癌的發病有年輕化趨勢，且由于缺乏早期診斷與高效的篩查方法，大多數患者確診時已發展至晚期或局部晚期，預后較差。隨著各種醫療技術的不斷發展以及化療藥物、靶向藥物的研制，對結直腸癌患者的臨床治療效果有了較大的改善，但從遠期生存率來看，大多數患者的生存率并沒有得到提高。隨著多組學高通量數據的快速增加，一些分子生物學標志物被發現在結直腸癌中表達異常并與預后相關，這使得更準確、有效地診療結直腸癌成為可能。

發明內容

本發明的目的是提供一種新的結直腸癌預后標志物RNF32，由此進一步提供檢測RNF32表達水平的試劑在制備用于結直腸癌輔助診斷和/或結直腸癌患者預后判斷的制劑中的應用以及一種用于結直腸癌輔助診斷和/或結直腸癌患者預后判斷的試劑盒。

環指蛋白32(Ring Finger Protein 32,RNF32)，又名FKSG33、HSD15和LMBR2，定位于7q36.3，包含18個外顯子，Gene ID:140545，其編碼蛋白質定位于內體、細胞核和細胞質。目前，有關RNF32基因在結直腸癌發生發展中的作用未見報道。本發明的發明人通過癌癥和腫瘤基因圖譜(Cancer Genome Atlas，TCGA)高通量數據挖掘發現RNF32高表達不利于結直腸癌患者預后，并通過收集臨床結直腸癌患者樣本和隨訪信息，進一步驗證RNF32表達差異對結直腸癌患者的預后作用。

為了實現上述目的，本發明的第一方面提供檢測環指蛋白32(RNF32)表達水平的試劑在制備用于結直腸癌輔助診斷和/或結直腸癌患者預后判斷的制劑中的應用。

進一步地，所述檢測RNF32表達水平包括檢測RNF32的基因表達水平和/或檢測RNF32的蛋白表達水平。

更具體地，所述檢測RNF32表達水平的方法包括：通過RT-qPCR方法檢測結直腸癌和癌旁組織中RNF32的表達量；通過分子探針技術檢測結直腸癌和癌旁組織中RNF32mRNA表達量；通過免疫組化或Western-Blot檢測結直腸癌和癌旁組織中RNF32蛋白表達量。

更具體地，所述檢測RNF32表達水平的試劑為靶向RNF32編碼DNA序列的寡核酸探針、PCR引物，或者為靶向RNF32的抗體。