[發明專利]一種葛根多糖脫蛋白的方法

在審

• 申請號: 201910315524.2
• 申請日: 2019-04-19
• 公開（公告）號: CN110028595A
• 公開（公告）日: 2019-07-19
• 發明（設計）人: 謝亮亮;蔡為榮
• 申請（專利權）人: 安徽工程大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京風雅頌專利代理有限公司 11403
• 代理人: 楊紅梅

本發明公開了一種葛根多糖脫蛋白的方法，涉及葛根多糖提純技術領域，將葛根多糖溶于去離子水中，配成葛根多糖溶液，經離心過濾后，采用聚酰胺對葛根多糖溶液進行脫蛋白處理，收集經聚酰胺處理后的多糖溶液，經旋轉蒸發濃縮后冷凍干燥得去除蛋白的葛根多糖，本發明得到的葛根多糖蛋白去除率和多糖保留率高，操作簡便，處理條件溫和，洗脫液為蒸餾水，避免了大量溶劑的使用，可以保持葛根多糖的生物活性，同時聚酰胺柱可以反復利用。

技術領域

本發明涉及葛根多糖提純技術領域，特別是指一種葛根多糖脫蛋白的方法。

背景技術

葛根(Radix Puerariae)是多年生豆科葛屬植物的塊根，始載于《神農本草經》，具有解肌退熱、生津、透疹、升陽止瀉等功效。隨著現代醫藥、食品科技的不斷發展，葛根的使用價值越來越引起人們的關注，我國葛根資源極為豐富，除新疆、西藏、青海外，各省均有分布，葛根的主要組成為淀粉、纖維素、蛋白質、總黃酮和多糖等。

多糖因其生物學活性而受到世界各國科學工作者的重視，大量的動物和臨床實驗表明其在人類健康上扮演著重要的角色，如抗氧化、抗凝血、抗轄射、抗HIV、抗癌、降低血糖、增強免疫等生物活性。多糖的結構決定了其具有廣泛的生物學活性，多糖的純化是多糖結構分析的前提。

去除蛋白質是多糖純化的重要一步，天然植物水提取液中多糖多與游離蛋白質共存。多糖提取液脫蛋白的主要方法有Sevage法、三氯乙酸法和三氟三氯乙烷法。其中，Sevage法條件溫和，是脫蛋白的經典方法，但需要反復處理樣品多次，致使多糖損失嚴重且方法煩瑣，而且使用有機溶劑，容易造成環境污染；三氯乙酸法操作時沉淀現象比Sevage法明顯，但脫蛋白時易損失較多多糖，對多糖結構影響較大，脫蛋白的效果較差；三氟三氯乙烷法脫除蛋白的效率較高，但溶劑沸點較低、易揮發，不宜大量應用。“一種芒果加工副產物多糖脫蛋白及脫色方法”(申請號CN201710394098)使用TCA正丁醇法，屬于有機溶劑脫蛋白，易造成污染環境；“一種狀元豆多糖脫色脫蛋白的純化方法”(申請號CN201710249849)，雖然沒有使用有機溶劑，而是使用D113弱酸性陽離子交換樹脂脫蛋白，但是優化后最高蛋白去除率為91.11％，無法滿足多糖純化的要求。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提出一種葛根多糖脫蛋白的方法，以解決現有技術中全部或者部分不足之處。

基于上述目的本發明提供的一種葛根多糖脫蛋白的方法，將葛根多糖溶于去離子水中，配成葛根多糖溶液，經離心過濾后，采用聚酰胺對葛根多糖溶液進行脫蛋白處理，收集經聚酰胺處理后的多糖溶液，經旋轉蒸發濃縮后冷凍干燥得去除蛋白的葛根多糖。

可選的，所述脫蛋白處理的方法為聚酰胺水浴靜態法或聚酰胺柱洗脫動態法。

可選的，所述聚酰胺水浴靜態法中，葛根多糖溶液的濃度為1～3mg/mL，聚酰胺為80～100目的顆粒，添加量為1～5g/L。

可選的，所述聚酰胺水浴靜態法中，水浴振蕩1～3h，溫度為30～60℃，轉速120～180r/min。

可選的，所述聚酰胺柱洗脫動態法中，葛根多糖溶液的濃度為10～30mg/mL，聚酰胺柱規格600×30mm，流動相為蒸餾水。

可選的，聚酰胺柱洗脫動態法中，流速為1～3mL/min，收集器2～4min轉一次，并采用苯酚-硫酸法跟蹤檢測洗脫溶液。

可選的，所述脫蛋白處理中的聚酰胺均為預處理的聚酰胺，預處理方法如下：用濃度75％～85％乙醇溶液處理聚酰胺，去除溶于乙醇的雜質，用蒸餾水將聚酰胺洗脫至中性。

可選的，所述旋轉蒸發濃縮，采用聚酰胺水浴靜態法的濃縮至原體積的1/5～1/4；采用聚酰胺柱洗脫動態法的濃縮至原體積的1/10～1/8。