[發明專利]峨眉槽舌蘭的快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201910305770.X
• 申請日: 2019-04-16
• 公開（公告）號: CN109964817B
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發明（設計）人: 谷海燕;熊鐵一;李策宏;謝孔平;余道平
• 申請（專利權）人: 四川省自然資源科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 成都金英專利代理事務所(普通合伙) 51218
• 代理人: 袁英

本發明公開了一種峨眉槽舌蘭蒴果的獲得及利用其種子繁殖獲得種苗的方法，屬于植物繁殖技術領域，采用具有一定遺傳距離的植株間進行人工授粉的方式獲得蒴果，結實率為100%；建立了峨眉槽舌蘭的快繁體系，其繁殖系數達到7倍以上，生根成苗率達到90%以上，為保護該物種的野生資源奠定科學技術基礎；獲得的優良峨眉槽舌蘭苗，為其可持續利用提供資源基礎和技術支撐，積極推動了該植物資源的產業化發展，具有極為重要的現實意義和經濟效益。

技術領域

本發明屬于植物繁殖技術領域，具體涉及峨眉槽舌蘭蒴果的獲得方法及其種子快速繁殖方法。

背景技術

峨眉槽舌蘭（Holcoglossum omeiense）為槽舌蘭屬植物中的低山植物類型，為我國峨眉山地區的特有種，僅分布在該地區的中低山地段。峨眉槽舌蘭由于分布區域極為狹窄，種群及個體數目均極少，屬于珍稀瀕危物種，被列入《極小種群（狹域分布）保護物種》、《中國生物多樣性紅色名錄（高等植物卷）》、《中國物種紅色名錄（植物部分）》和《中國珍稀瀕危植物圖鑒》中。目前，峨眉槽舌蘭由于為全國極小種群野生植物，已被列入國家拯救保護工程——國家林業局和國家發改委印發的《全國極小種群野生植物拯救保護工程規劃》120種極小種群保護物種中，屬于列入該拯救規劃里11種分布于四川省的野生植物之一。

峨眉槽舌蘭為蘭科槽舌蘭屬的多年生草本植物，附生在林中樹干上。目前峨眉槽舌蘭野生植株數量甚少，為珍稀瀕危、極小種群野生植物,具有極高的科研價值；另外，峨眉槽舌蘭形態優雅清秀，花色潔白典雅，具有極高的園藝觀賞價值。目前，隨著經濟和峨眉旅游的發展、科研及蘭花愛好者的采集，該植物在其生態環境受到破壞的同時，亦遭受到了過度的采挖，給野生種群造成了極大的威脅。

我國關于峨眉槽舌蘭植物的研究極其缺乏，僅了解峨眉槽舌蘭分布區域狹窄、大致分布的地點、數量極為稀少等這些粗略信息，關于峨眉槽舌蘭繁殖方面的研究尚屬空白，目前我國科研人員未能成功繁殖出峨眉槽舌蘭植株。

發明內容

針對該植物為極小種群植物，野外資源數量極少、野外無法采集到峨眉槽舌蘭蒴果、現有技術中缺乏系統而快速的峨眉槽舌蘭的繁殖方法，本發明目的在于提供一種峨眉槽舌蘭蒴果獲得的方法以及快速繁殖方法。本發明通過獲得人工授粉方式獲得健壯峨眉槽舌蘭蒴果，并利用其種子開展繁殖研究，建立其快繁技術體系，對保護峨眉槽舌蘭珍貴的野生資源具有重要的現實意義。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

峨眉槽舌蘭的快速繁殖方法，包括以下步驟：

a蒴果的獲得：選擇適應性強、生長旺盛及能順利完成一個生命周期的植株，在花期內，采用來自不同種群的植株分別為授粉的父母本進行人工授粉，獲得蒴果，蒴果在授粉后380-520d后未開裂時采摘；

b蒴果的處理：將采摘的峨眉槽舌蘭蒴果在自來水下沖洗5～10min后，用濾紙吸干水分；隨后分別用質量濃度75%酒精處理30～35s、質量濃度0.1%升汞溶液滅菌15～18min，并各自用無菌水沖洗4～6次，最后用無菌濾紙吸干表面的水分；在無菌條件下剪開蒴果得到種子；

c誘導培養：將步驟b中獲得的種子均勻撒播在誘導培養基上，誘導原球莖；

d增殖分化培養：將步驟c中已明顯可見綠色葉原基的原球莖接種到增殖分化培養基上進行增殖分化培養；所述增殖分化培養中，首先進行10-15d的暗培養；隨后光照強度為1500-2000Lx，光照時間為12h/d，培養時間為90-100d，培養溫度為20±1℃；

e生根培養：將步驟d中原球莖分化生長為具有4-6片已成型的葉片、高1-2cm的組培苗，切除其根系后，淺插入生根培養基中，深度為1-2mm，轉入生根培養基后，首先進行10-15d的暗培養，隨后光照強度為1500-2000Lx，光照時間12h/d，培養時間120-130d；培養溫度為20±1℃；