[發明專利]一種從紅豆杉中提取抗哮喘炎癥提取物的方法及應用

有效

• 申請號: 201910305065.X
• 申請日: 2019-04-16
• 公開（公告）號: CN109966323B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 朱婉萍;黃飛華;王昱霽;王楠楠;蔡婷婷;劉霞;江石平
• 申請（專利權）人: 浙江省中醫藥研究院
• 主分類號: A61K31/337
• 分類號: A61K31/337;A61K36/13;A61P11/06;A61P29/00;A61P11/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

本發明公開了一種從紅豆杉中提取抗哮喘炎癥提取物的方法，所述抗哮喘炎癥提取物為紫杉烷類提取物、含總黃酮提取物或含萜類的揮發油，包括：將紅豆杉粉經過超臨界CO₂和有機溶劑萃取，再利用高速逆流色譜儀分離純化得到紫杉烷類提取物；或將紅豆杉粉利用超臨界CO₂萃取得到含總黃酮提取物；或將紅豆杉粉經過醇提后，兩次分子蒸餾濃縮得到含萜類的揮發油。得到的紫杉烷類提取物能顯著減少哮喘的嗜酸性粒細胞和中性粒細胞，能較好的抑制哮喘炎癥，顯著地改善哮喘肺功能。得到的含總黃酮提取物和含萜類的揮發油均能顯著減少肺組織炎癥面積，改善了肺功能，降低了肺阻力，增加了肺順應性，在治療哮喘中具有極強的應用前景。

技術領域

本發明屬于藥用植物開發領域，具體涉及一種從紅豆杉中提取抗哮喘炎癥提取物的方法及應用。

背景技術

紅豆杉是紅豆杉科紅豆杉屬植物的總稱。紅豆杉的藥用價值早在《本草綱目》中就有記載，主要用于治療霍亂、傷寒及用于排毒。《現代中醫大辭典》、《本草推陳》中都有記載，其性味苦、平、有小毒，歸心經，功效消腫散結，主治腫瘤、腎病、風濕等，現代中醫亦將其用于治療糖尿病、腎病及婦科疾病等。目前已從紅豆杉植物中分離出400多種化合物，主要成分為紫杉烷類和非紫杉烷類兩種。紫杉烷類為紫杉烷二萜類化合物，非紫杉烷類化合物主要為三萜、甾體、高萜、黃酮、苯丙素類和酚類等。

現有技術中公開了大量從紅豆杉中提取有效成分的方法，如公開號為CN103099826A的專利申請文獻公開了一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，通過超臨界萃取釜萃取，甲醇吸收，AB-8樹脂層析后，再100 目聚酰胺層析，乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末。

公開號為CN104248649A的中國發明專利申請文獻公開了一種紅豆杉提取物的制備方法，包括：1)準備紅豆杉原料；2)超聲破壁處理；3)酶解；4)回流提取處理，過濾、濃縮、噴霧干燥，得到的紅豆杉提取物含有黃酮、多糖、低聚糖、小分子蛋白、肽、氨基酸等多種具有生物功能的水溶性成分，可以用來制備抗腫瘤、糖尿病、提高免疫力、調節血脂水平、降壓、治療風濕、預防冠心病的藥物。

哮喘又名支氣管哮喘，支氣管哮喘是由多種細胞及細胞組分參與的慢性氣道炎癥，此種炎癥常伴隨引起氣道反應性增高，導致反復發作的喘息、氣促、胸悶和/或咳嗽等癥狀，多在夜間和/或凌晨發生，有的患者會由于缺氧而呈現焦躁不安、出汗、精力委靡、表情慘白等癥狀，嚴重的還會有性命危險。因此，提取能抑制哮喘炎癥從而改善哮喘肺功能的有效成分，在醫學領域具有極強的應用價值。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種從紅豆杉中提取抗哮喘炎癥提取物的方法，操作簡單便捷，得到的抗哮喘炎癥提取物均具能較好的抑制哮喘炎癥，顯著地改善哮喘肺功能。

本發明的另一目的在于提供了上述抗哮喘炎癥提取物在制備治療哮喘藥物中的應用。

具體的技術方案如下：

一種從紅豆杉中提取抗哮喘炎癥提取物的方法，所述抗哮喘炎癥提取物為紫杉烷類提取物，包括如下步驟：

(1)將紅豆杉枝葉粉碎后，過篩，將得到的紅豆杉粉利用超臨界CO₂萃取，將得到的紅豆杉浸膏再經過有機溶劑萃取得紅豆杉粗提物；

(2)將紅豆杉粗提物制成樣品溶液后利用高速逆流色譜儀(HSCCC) 分離純化，具體條件為：溶劑體系以體積比計量為正己烷：乙酸乙酯：甲醇：乙醇：水＝5∶5∶5∶1∶6.5，上相為固定相，下相為流動相，流速2～5 ml/min，轉速800～1000r/min，檢測波長254nm，收集80～150min的流分得到所述紫杉烷類提取物。

本發明用SFC萃取后，再用二氯甲烷提取，再經過HSCCC，收集所需的餾分制得了紫杉烷類紅豆杉提取物，該提取物中主要含有紫杉醇、 10-DAB等具有相同母核的化合物，這類化合物能顯著減少白細胞總數和嗜酸性粒細胞的百分比，能較好的抑制哮喘炎癥，顯著地改善哮喘肺功能。