[發(fā)明專利]糞便核酸保存液及其制備方法和應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910298925.1 | 申請日： | 2019-04-15 |
| 公開（公告）號： | CN111826371A | 公開（公告）日： | 2020-10-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王婷婷;吳瓊;李佩璐;秦楠 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海銳翌生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 趙天月 |
| 地址： | 200050 上海市閔行區(qū)*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 糞便 核酸 保存 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種糞便核酸保存液，其特征在于：包括：
Tris-HCl緩沖液，所述Tris-HCl緩沖液的濃度為0.01～1M；
EDTA，所述EDTA的濃度為0.01～1M；
氯化鈉，所述氯化鈉的濃度為0.01～0.5M；
檸檬酸鈉，所述檸檬酸鈉的濃度為0.01～0.5M；
無水乙醇，所述無水乙醇的體積濃度為10～30％；
所述保存液pH值為7.0-10.0。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保存液，其特征在于，
所述Tris-HCl緩沖液的濃度為0.1～0.5M；
所述EDTA的濃度為0.1～0.5M；
所述氯化鈉的濃度為0.05～0.5M；
所述檸檬酸鈉的濃度為0.05～0.3M；
所述無水乙醇的體積濃度為15～30％；
所述保存液pH值為7.5-9.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保存液，其特征在于，
所述Tris-HCl緩沖液的濃度為0.5M；
所述EDTA的濃度為0.15M；
所述氯化鈉的濃度為0.5M；
所述檸檬酸鈉的濃度為0.1M；
所述無水乙醇的體積濃度為20％；
所述保存液pH值為8.0。
4.一種權(quán)利要求1～3中任一項所述的保存液的制備方法，其特征在于：包括：
(1)稱取所需量的Tris，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.0-10.0，制得Tris-HCl緩沖液；
(2)將所需量的EDTA溶于無菌去離子水，調(diào)節(jié)pH至5.0-10.0，制得EDTA溶液；
(3)將所需量的氯化鈉和檸檬酸鈉溶于無菌去離子水，并與所述Tris-HCl緩沖液、EDTA溶液混合，調(diào)節(jié)pH值至7.0-10.0，進行高壓滅菌，獲得滅菌溶液；
(4)將所需量的無水乙醇與所述滅菌溶液混合，微孔濾膜除菌，獲得所述保存液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述高壓滅菌為在121℃下高壓滅菌30分鐘。
6.一種糞便樣本保存方法，其特征在于，包括：
將所述糞便樣本和保存液等體積混合，密封遮光，在40℃以下溫度保存，
其中，所述保存液為權(quán)利要求1～3中任一項所述的保存液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的保存方法，其特征在于，將所述糞便樣本和所述保存液等體積混合，密封遮光，在-20℃下溫度保存。
8.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1～3中任一項所述的糞便核酸保存液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的試劑盒，其特征在于，進一步包括：取樣管，所述取樣管中裝有所述糞便核酸保存液，所述取樣管密封包裝。
10.一種試劑盒，其特征在于，包括：Tris-HCl緩沖液、EDTA、氯化鈉、檸檬酸鈉和無水乙醇；所述Tris-HCl緩沖液、EDTA、氯化鈉、檸檬酸鈉、無水乙醇各自在不同的容器中。
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