[發明專利]一種提取杜仲含膠細胞的方法

在審

• 申請號: 201910297769.7
• 申請日: 2019-04-15
• 公開（公告）號: CN111826336A
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發明（設計）人: 趙秀英;趙喜源;張繼川;劉力
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04
• 代理公司: 北京知舟專利事務所(普通合伙) 11550
• 代理人: 周媛

本發明公開了一種提取杜仲含膠細胞的方法。方法包括：新鮮杜仲葉經預處理、變性處理、整體透明處理和含膠細胞解離，提取杜仲含膠細胞。所述預處理包括：新鮮杜仲葉放入烘箱中進行殺青處理，并中低溫下烘干至重量不變。本發明通過對新鮮杜仲葉片的預處理，改善其工藝條件，大大縮短了從杜仲葉中提取杜仲含膠細胞這一實驗工藝的工藝時長，有效解決了杜仲含膠細胞在實驗過程中容易破壞的問題，提高了提取效率。

技術領域

本發明涉及杜仲膠技術領域，進一步地說，是涉及一種提取杜仲含膠細胞的方法。

背景技術

對于杜仲含膠細胞提取方式的研究，目前相關文獻報道較少，最近的相關文獻報道采用的是新鮮的杜仲植株，將其洗凈瀝水，剪成小段，未用固定液固定而直接采用變性試劑處理40-60小時，通過變性處理后，再經高濃度氫氧化鈉水溶液并配合水浴加熱進行整體透明處理約20-40小時，之后將樣品過濾，流水沖洗，并用果膠酶水溶液在室溫下進行離析作用45-65小時直至將杜仲含膠細胞分離出來。該技術工藝主要存在以下不足：

(1)該技術工藝反應時間過長即在實驗過程中含膠細胞需要長時間與具有強氧化性的化學試劑反應，極易導致含膠細胞細胞壁破裂溶解，使得膠體流出溶解，進而影響杜仲含膠細胞的提取率。

(2)未經預處理的新鮮植株在變性反應階段難以與化學試劑充分反反應，導致褪色不徹底，進而影響后續反應，不利于杜仲含膠細胞的提取甚至使得該實驗失敗。

目前所存在的杜仲含膠細胞的提取方法存在著化學污染大，提取效率不高，提取物杜仲含膠細胞純度過低等一系列不足。

發明內容

為解決現有技術工藝時間過長，提取效率低下且提取率不高的問題。本發明提供了一種提取杜仲含膠細胞的方法。著重解決了在反應過程中尤其第一階段即變性處理階段，杜仲葉褪色不徹底的問題。本發明通過對新鮮杜仲葉片的預處理，改善其工藝條件，大大縮短了從杜仲葉中提取杜仲含膠細胞這一實驗工藝的工藝時長，有效解決了杜仲含膠細胞在實驗過程中容易破壞的問題，提高了提取效率。

本發明的目的之一是提供一種提取杜仲含膠細胞的方法。

包括：

新鮮杜仲葉經預處理、變性處理、整體透明處理和含膠細胞解離，提取杜仲含膠細胞。

其中，

所述預處理包括：新鮮杜仲葉放入烘箱中進行殺青處理，并中低溫下烘干至重量不變。

殺青處理時，烘箱溫度為100℃～130℃，殺青處理時間10-20分鐘；然后將溫度調至55℃～65℃，烘至重量不變。

所述變性處理包括：經預處理的杜仲干葉片加入到變性試劑中，攪拌使其混合均勻，密封避光保存40～50小時；

杜仲干葉片的體積為變性試劑體積的三十分之一到二十分之一。

所述整體透明處理包括：

將變性處理后的杜仲干葉片過濾，取其濾渣，并用去離子水反復沖洗干凈，將過濾后的葉片加入氫氧化鈉溶液中，攪拌，使得葉片完全浸入到溶液中，之后放入水浴鍋中，50～65℃加熱反應10～20小時。

去離子水沖洗的流速為1.5米/秒～3米/秒；

氫氧化鈉溶液的質量濃度為5％～20％。

所述含膠細胞的解離包括：

將經過整體透明后的杜仲干葉片過濾，用去離子水反復沖洗濾渣，然后將濾渣放入果膠酶溶液中，35℃～55℃水浴加熱30～40小時。

去離子水沖洗流速為1.5米/秒～3米/秒；

果膠酶溶液的質量濃度范圍為2％～5％。