[發明專利]陸地棉基因組的精確高效編輯方法有效
| 申請號： | 201910290886.0 | 申請日： | 2019-04-11 |
| 公開（公告）號： | CN110283840B | 公開（公告）日： | 2021-04-13 |
| 發明（設計）人： | 金雙俠;李波;芮杭萍;李亞軍;王瓊瓊;張獻龍 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;C12N15/66 |
| 代理公司： | 武漢宇晨專利事務所 42001 | 代理人： | 張紅兵 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 陸地棉 基因組 精確 高效 編輯 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種轉化載體GhRBE3在陸地棉基因編輯中的應用，其特征在于，所述轉化載體GhRBE3的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.一種適用于陸地棉基因組編輯的如權利要求1中所述轉化載體GhRBE3的制備方法，其特征在于，所述制備方法的步驟為：
（1）獲得目的序列LbCpf1-NLS-3xHA，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：4所示，該目的序列通過以下步驟制備獲得：
1）在SEQ ID NO：2所示序列的pHUN611載體上設計引物，所述引物的序列如下所示：
正向引物：AAAAAGCAGGCTTCGAAATGTCCAAGCTGGAGAAGTTTACA，
反向引物為：GAAAGCTGGGTCTAGATTAGGCATAGTCGGGGACATC；
2）以pHUN611載體為模板，進行PCR擴增，獲得LbCpf1-NLS-3xHA目的序列，該目的序列如SEQ ID NO：4所示；
（2）利用
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